王 娟，李芳琼，张枝倩，王 伟

(1. 浙江省立同德医院检验科，浙江 杭州 310012；2. 浙江中医药大学医学技术学院，浙江 杭州 310053)

雷公藤甲素(triptolide，TP)是从雷公藤中分离出的活性较高的环氧化二萜内酯化合物，又名雷公藤内酯醇，是雷公藤的主要活性成分。研究发现TP在体内外实验中均显示良好抗肿瘤活性，并且TP对肿瘤的抑制作用相当广谱。TP可通过多种机制诱导多种肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤细胞周期，包括卵巢癌[1]、胰腺癌[2]、乳腺癌[3]、肝癌[4]和肺癌[5]等来源的肿瘤细胞株。本项目组前期研究发现，TP可通过激活caspase-3/9、增加Bax/Bcl的比率和促使线粒体释放细胞色素C进而诱导肺癌细胞凋亡[6]。目前，关于TP诱导凋亡和抑制细胞周期的分子已经研究得较为深入，但从核糖体生物合成的角度探讨雷公藤甲素抑制肿瘤的研究还未见报道。

在我们前期研究中，利用同位素标记相对和绝对定量技术(isobaric tags for relative and absolute quantitation，iTRAQ)标记后的质谱检测技术发现，TP作用于A549非小细胞肺癌细胞后， 肝细胞癌抗原(hepatocellular carcinoma antigen 66，HCA66)的表达明显下降[7]。HCA66作为核糖体生物合成网络的重要组分，它在TP抑制肺癌细胞中的作用目前还未见报道。为进一步探讨HCA66在TP抑制肺癌细胞中的作用，我们将在前期研究的基础上，进一步通过干扰HCA66的表达，检测核糖体18S的合成变化，利用析18S的生物合成，探索TP抑制肺癌的作用机制，为TP治疗肺癌提供科学的理论支持。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1细胞株 非小细胞肺癌A549细胞系由姚航平教授(浙江大学)馈赠。

1.1.2药物与化学试剂 雷公藤甲素购买自美国Sigma Aldrich(T3652)公司，用二甲基亚砜溶解成100 μg·L-1的储存液后，分装保存于-80 ℃冰箱，实验前用培养液稀释至所需浓度。……