郭晶晶 方 茜 刘亚楠 曲 沛 马雪瀛 王 爽 方 伟 周 茹 张 响 汤云霞 杨思园 于凤婷 王雅杰*

(1.首都医科大学附属北京地坛医院检验科,北京 100015；2.首都医科大学附属北京地坛医院感染急诊中心实验室,北京 100015)

2019年12月,新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情发生以来，此疫情已成为全世界高度关注和共同面对的严峻问题[1-3]。患者到医院就诊所采集的标本类型和质量，关系到是否及时准确的确诊结果，为比较不同呼吸道标本的病毒核酸检测效果[4]，本研究对31 例新型冠状病毒确诊病例的咽拭子与痰标本进行病毒核酸结果的比较。

1 对象与方法

1.1 研究对象

收集自 2020 年2 月1 日至2月15日首都医科大学附属北京地坛医院检测的918份样本中31例确诊为新型冠状病毒阳性患者同一时间采集的咽拭子与痰标本，对结果进行观察比较。31例确诊患者中，男性11例(35.48%)，女性20例(64.52%)，年龄32～92岁。

1.2 病毒核酸的检测

RNA 提取：对临床采集的标本进行水浴56 ℃，30 min灭活；咽拭子直接水浴56 ℃，30 min灭活；黏稠的痰，加入适量的痰消化液，10 min，待呈均质后水浴56 ℃，30 min灭活。提取病毒的 RNA 采用 QIAamp viral RNA mini kit(Qiagen公司, 德国)试剂盒，从 140 μL 的标本(咽拭子和痰标本)中获得 60 μL 的总RNA溶液，提取的RNA立即使用。

1.3 人体上皮细胞RNP基因、病毒ORF1ab基因、N基因的检测

采用荧光PCR方法进行检测，仪器为ABI 7500，应用2019株新型冠状病毒(2019-novel coronavirus, 2019-nCoV)核酸检测试剂盒(上海伯杰医疗科技有限公司)进行人体上皮细胞基因RNP、病毒ORF1ab基因、N基因的检测。按照试剂盒说明书配制体系，ABI 7500 荧光定量 PCR 仪不选 ROX 校正，淬灭基团选 None, 反应程序见表1。判定标准：阳性(Ct值≤38，典型扩增曲线)，灰区(Ct值>38)，阴性(Ct值>38 或无，无扩增曲线)。