潘宇晨 李京蔓 李 丹 窦 环 侯亚义 (南京大学医学院,南京 210093)

恶性黑色素瘤是最严重的一种皮肤癌，难以根治。尽管免疫检查点的发现推动了肿瘤免疫疗法的进步，但肿瘤免疫疗法仍有很多不足之处[1，2]。个体化的肿瘤疫苗提高了肿瘤的治疗效果，并有效地防止其复发[3]，但由于制备时间久、成本较高，其应用受到较大限制。因此，开发更有效更经济的方法来辅助治疗黑色素瘤是非常重要的。

巨噬细胞是固有免疫系统中被广泛研究的具有异质性的细胞，是机体抵抗感染的重要组成部分。巨噬细胞通过分泌炎症因子[如肿瘤坏死因子(TNF-α)]、产生氧化应激反应(如产生一氧化氮、活性氧等)能够抑制肿瘤的生长、转移，并通过吞噬作用消除恶性肿瘤细胞[4]。先前的实验发现，活化巨噬细胞并促进其向促炎的M1型极化有利于黑色素瘤小鼠的治疗[5]。

鹿血晶(deer blood crystal,DBC)由鹿血制得，富含多糖、氨基酸、微量元素等。近年来发现鹿血具有治疗贫血、调节免疫、抗肿瘤、延缓衰老、改善记忆、抗疲劳、改善性功能等多种治疗保健作用[6]。本文旨在研究鹿血晶对巨噬细胞杀伤黑色素瘤的影响及潜在的分子机制，为临床中药联合肿瘤治疗的应用提供参考。

1 材料与方法

1.1材料 鹿血晶冻干粉来自苏州红冠庄国药股份有限公司(批号：S1810012)；B16F10细胞株和Raw264.7细胞株购自中国科学院细胞库；DMEM高糖培养基、胎牛血清、胰酶、双抗均购自上海基峰生物科技有限公司；CCK8试剂盒购自日本同仁化学研究所；凋亡试剂盒、RNA反转录试剂盒购自南京诺唯赞生物科技有限公司；……