紫茄超氧化物歧化酶的提取及其活性测定
2020-03-13潘百明苏辉兰梁昌祥覃晓婷
食品工业 2020年2期
潘百明,苏辉兰,梁昌祥,覃晓婷
贺州学院(贺州 542899)
紫茄也称茄子、茄,为茄科植物,营养成分丰富,如含有胆碱、蛋白质、铁、维生素、钾等多种成分;紫茄中含超氧化物歧化酶(SOD)。SOD是生物体内氧自由基的天然清除剂,具有广泛的医用价值,可作为药品、食品及日化产品的添加剂。SOD产品对市场的需求量较大,试验采用邻苯三酚自氧化法[1],从紫茄中提取SOD并测定其活性,为寻找更廉价易得的SOD产品提取原料提供依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
新鲜紫茄(市售)。
1.2 试验设备与仪器
HB-J 303打浆机(中山市汉宝隆电器有限公司);H-1850 R冷冻离心机(湖南湘仪实验室仪器开发有限公司);JY99-IIDN超声波细胞粉碎机(宁波新芝生物科技股份有限公司);HH-S 2数显恒温水浴锅(金坛市医疗仪器厂);723 N紫外-可见分光光度计(上海佑科仪器仪表有限公司。
1.3 药品与试剂
磷酸二氢钠(天津市科密欧化学试剂有限公司);磷酸氢二钠(天津市科密欧化学试剂有限公司);三羟甲基氨基甲烷(上海润捷化学试剂有限公司);乙二胺四乙酸二钠(成都市科龙化工试剂厂);焦性没食子酸(国药集团化学试剂有限公司);三氯甲烷(西陇化工股份有限公司);无水乙醇(广东华光科技股份有限公司);丙酮(西陇化工股份有限公司);盐酸(西陇化工股份有限公司)。试剂均为分析纯。
1.4 试验方法
1.4.1 SOD酶液的提取
1) SOD提取
称取用蒸馏水清洗3遍紫茄40 g,放入打浆机中打碎,而后用纱布过滤残渣,加入3倍体积pH 7.8、0.05 mol/L的磷酸缓冲液,放入超声破碎仪中超声15 min,使SOD溶解到缓冲液中,然后再放入冷冻离心机中常温离心15 min,取上清液。……
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