农药对于防治农作物病虫害具有重要作用，但也给农产品质量安全带来隐患，因此，蔬菜农药残留检测逐渐受到社会关注。现阶段，中国十分重视蔬菜质量安全问题，监管力度不断加强，各地监管机构、批发市场、超市、生产基地等相继建立了蔬菜农药残留检测室与检测点。蔬菜农药残毒检测技术是现如今比较普遍的农药残留检测方法，方法简单，易于操作，已被各检测主体广泛使用。本文分析了蔬菜农药残毒检测技术注意事项，以期更好地开展蔬菜农药残留检测工作。

1药品配制和处理

1.1药品配制

药品配制和保存过程主要包括配置提取液、酶液、底物和显色剂。提取液是稀释其他配制剂的重要液体，提取液的配制过程十分重要。受药品纯度及实验室湿度影响，缓冲液pH值会有所差别。正常情况下，最后配比出的提取液通常无法达到规定值要求。建议在配制完成后，用pH计来校正提取液pH值。

显色剂、酶液、底物在高温环境中容易发生变质进而失去效果。所以，在配制药液的过程中可以采用分装制，随用随取，这种方法可以避免药品浪费，保证药品质量。酶是决定检测技术成功与否的重要成分。酶的活性、纯度、反应时酶的浓度等都会影响最后的检测结果。因此，应合理控制这些因素，保证检测结果准确。

1.2样品前期处理

在取样时，要根据不同蔬菜种类选择不同部位取样。例如叶菜类应去掉枯叶和腐叶，进而再收集植株的不同叶片；豆菜和果菜类需在表皮到果肉部分1～1.5 cm处取样，果肉取样要适量；含有叶绿素和色素比较高的其他蔬菜，禁止立刻进行加液提取，否则会快速氧化，提取液的颜色会变深。

1.3制备培养样品

在选择培养管时，容量最好与培养量相符合，避免检测结果误差较大。同时，需把培养箱的温度控制在37～38℃，培养时间控制为30 min。

2检测值常见问题

2.1空白值

首先，在操作仪器之前要保证仪器稳定，比色杯没有较大色差。其次，要严格控制样品从培养箱取出到上机这段时间。丁酰胆碱酯酶样品的空白值受时间影响较大，丁酰胆碱酯酶稳定性较差，活性较高，在加入底物之后反应速度较快，所以要缩短操作时间，避免空白值迅速减小。因此，不同种类的酶在不同检测条件下样品空白值各不相同。

2.2吸光值

样品吸光值偏高是在检测中经常会出现的问题。根本原因是酶的活性发生变化和反应中产生的化学、物理干扰。酶失效导致自身颜色发生变化，样品本底颜色较深，提取液中的样品组织液形成乳浊液等透光之后被散色，导致透光率降低，吸光度逐渐增大。

2.3抑制率

在检测结果中，有时会出现抑制率为负数的情况，个别样品会出现较小的负值误差，这主要是由于操作误差导致。酶分解底物时，分解物与显色剂相结合时速度较快，若操作方法不科学容易造成误差，从而使抑制率变成负数。

2.4假阳性假阴性

假阳性是因为酶活性降低或者失活，导致在底物中无法发生作用，底物无法被水解，不能与显色剂相结合从而显色造成。结果与提取液中存在农药抑制酶的活性相类似。假阴性是由于某种农药对酶没有明显抑制作用而产生的，表现出没有农药的假象。除此之外，在反应过程中，化学干扰也会发生假阴性和假阳性的情况。检测人员需选择敏感性较强的酶，降低假阳性和假阴性发生概率。

3其他注意事项

3.1仪器使用条件

應科学控制实验室温度及湿度，保证仪器正常使用。实验室室内温度应控制在20～30℃，相对湿度要低于85%，否则会影响酶的活性及检测结果。酶在室温下培养时，22℃需培养20 min，25℃需培养15 min，若室温低于20℃，必须将酶放入37～38℃的保温箱中进行培养。

3.2样品数量

蔬菜样品重量应为2～2.5 kg，最好将其分成3份，一份备案，一份用于复检，一份在检测时使用。

3.3用水选择

溶液试剂用水最好选择蒸馏水，也可以使用等离子水和纯净水，避免用矿泉水和自来水。

3.4样液浸提

在样液浸提时，用超声提取仪进行提取较为适宜，也可以使用振荡器振荡浸提。无法使用仪器浸提时，应用晃动的方式浸提。浸提时间要充足且适当，时间过长或者过短都会影响检测结果。

3.5器具清洗

在检测过程中用到的所有器具，在重复使用之前都必须进行浸泡，再用自来水冲洗5遍，然后用蒸馏水清洗2遍，洗净之后再用。

3.6比色瓶保护

对比色瓶做好清洁保护，可减少实验误差。比色瓶在插进比色槽之前，必须要用清洗布或者干净柔软的纸张进行擦拭，然后再准确插入比色槽。在检测结束后，要将比色瓶里面的溶液及时倒掉，再用自来水进行清洁，避免污染或溶液腐蚀比色瓶；在使用前，先用蒸馏水冲洗2次，甩干后用擦镜纸把瓶子表面擦干。

3.7辛辣等样液检测

需使用酶抑制法快速检测葱、姜、蒜等一些辛辣性蔬菜农药残留，但可能出现假阳性的情况，且辛辣味越强烈的蔬菜就越有可能出现假阳性。所以，在浸提辛辣蔬菜类样品时，需要在其中加入专用消除剂来隔绝辛辣物质的干扰，用特殊的方法进行浸提。

3.8确认结果

在获得初测结果后，对不合格样品要在标准检测室中进一步检测与定性，进行精确确认。在用气相色谱或液相技术进行检测时，用双毛细管柱、双检定器气相色谱、高效液相色谱检测进行定性及定量分析。这种检测方法能快速准确检测出蔬菜中的有机磷、有机氯、氧基甲酸酯等农药残留。

3.9加强监督

蔬菜农药残留检测只能检测小部分蔬菜样品，无法覆盖到市场上全部蔬菜种类，因此在日常管理中，应加强对农户农药使用情况的监督，引导农户正确使用农药，提高环境保护意识。严格按照低毒无残留标准种植蔬菜，保障食品安全。

3.10检测资料管理

检测结果除了需做好电子备份外，还应该准备纸质资料建档，方便查询和长期储存。

蔬菜是十分重要的食物，可为人体补充各种维生素及膳食纤维，但随着蔬菜需求量的不断上涨，一些高农残蔬菜也开始流入市场，所以各地必须重视蔬菜农药残留检测工作。

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