张放 孙怡芸 梁晓倩 杨爽

1976 年Friedenstein 等［1］首次证实骨髓中存在间充质干细胞（mesenchymal stem cells, MSC），发现其可以作为壁龛细胞对造血干细胞发挥支持和辅助的作用。随着研究的深入，MSC 被证实为人体内重要的多能干细胞，主要存在于机体多种结缔组织，不仅具有低免疫原性的特点，还具有强大的免疫调节和多向分化功能［2］。近年来研究显示，MSC 是人体内成骨细胞的主要来源，可作为组织工程与修复医学的种子细胞，广泛应用于骨折修复、组织重建等再生医学领域［3，4］。然而，在实际应用中却发现，MSC移植后在体内定向分化效率较低，限制了MSC的临床应用［5］。如何进一步提高MSC 成骨分化效率，从而推动其临床应用，是当前研究的重点与热点。

MSC成骨分化受到多种炎症因子的调控［6］。白细胞介素23（interleukin-23,IL-23）属于IL-12家族中的一类促炎因子，主要由巨噬细胞和树突状细胞产生，发挥调控多种T细胞分化、增殖的功能［7］。已有研究发现，IL-12家族中多个因子对MSC的功能有重要的调控作用，但IL-23 对MSC 功能影响的研究较少［8］。在本研究中，我们拟在体外探讨IL-23对MSC成骨分化功能的调控作用，探索提高MSC分化效率的方法。

材料与方法

一、主要材料与仪器

H-DMEM 培养基、0.25%胰蛋白酶-EDTA（Gibco，美国）；胎牛血清（杭州四季青，中国）；PBS 缓冲液、Percoll分离液、RIPA蛋白裂解液、蛋白定量试剂盒、氯仿、异丙醇、无水乙醇、多聚甲醛、焦碳酸二乙酯（DEPC）水（碧云天公司，中国）；地塞米松、β-磷酸甘油、抗坏血酸、氯化十六烷基吡啶（CPC）、茜素红（Sigma，美国）；碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性检测试剂盒（南京建成生物，中国）；IL-23（R&D，美国）；……