运动后的血清对乳腺癌MCF-7细胞Rictor表达的影响*
2019-10-23张佳琪荣晓慧亢瑞媛赵瑞娟胡育哲陈英姿胡焕焕姬国杰
张佳琪, 荣晓慧, 亢瑞媛, 赵瑞娟, 胡育哲, 陈英姿, 胡焕焕△, 姬国杰△
新乡医学院三全学院 1生命科学技术学院, 2仁智书院(河南新乡 453003)
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤[1],近年来发病率呈明显上升且有年轻化趋势[2-3]。大量流行病学研究表明体育活动水平与乳腺癌风险存在明显的负相关关系[4]。细胞培养研究证实, 2 h急性运动后的血清能明显降低MCF-7乳腺癌细胞的细胞活力和成瘤能力[5],荷瘤小鼠进行跑步训练实验结果也表现出对肿瘤生长的抑制[6]。但是其作用的中间环节仍尚未明确。雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamyein, mTOR)是生长因子和细胞因子下游的主要信号传导通路,参与调控细胞存活、增殖和分化;以mTORC1和mTORC2两种复合体形式存在[7]。Rictor作为mTORC2的核心组成分,通过其下游因子调控肌动蛋白的结构,加强癌细胞的生长速度及生存能力[8]。2018年6—8月,本研究采用运动前后的血清作用于乳腺癌MCF-7细胞,观察细胞活力以及 Rictor mRNA 表达的差异,探讨运动依赖性抑制乳腺癌细胞生长效应的可能机制,现报告如下。
1 材料与方法
1.1 细胞株及主要试剂仪器 乳腺癌MCF-7细胞株由本实验室保存。RPMI 1640培养基,胎牛血清(Gibco,美国);二甲基亚砜(DMSO),Trizol 细胞裂解液(Invitrogen,美国)。电子分析天平(ME204,梅特勒)、落地冷冻高速离心机(Thermo/Multifuge X1R,美国)、梯度 PCR 仪(Sensoquestlabcycler standard,德国 senso)、凝胶成像系统(Bio-Rad)、电泳仪(Power Pac Universal, Bio-Rad)。
1.2 细胞培养 乳腺癌MCF-7细胞用含有10%胎牛血清的RPMI 1640培养基在37℃、5% CO2条件下培养,每天换液1次,1.5~2 d传代,取对数生长期细胞用于本实验。
1.3 血清采集处理及应用方法 5名志愿者于清晨空腹休息30 min后进行静脉釆血3 mL(普通管),静置后以3 000 r/min离心15 min,分装转存于无菌EP管中,于-20℃冷藏备用,作为运动前血清使用;……
