李凯军 陈俊

摘要：目的：探讨miR-146a对甲状腺相关眼病眼眶成纤维细胞IL-6和IL-8的调节作用。方法：本研究设实验组和对照组两组，通过原代细胞培养技术获得体外培养眼眶成纤维细胞，再利用携带目的基因的慢病毒转染眼眶成纤维细胞，过表达或抑制眼眶成纤维细胞miR-146a的表达水平，进而通过ELISA法检测IL-6和IL-8的表达水平。结果：TAO患者眼眶成纤维细胞48h上清液中IL-6和IL-8水平明显升高，结果与正常组有统计学差异（P<0.05）。在TAO患者眼眶成纤维细胞中，上调miR-146a表达水平，IL-6和IL-8水平下降（P<0.05）;同时，下调miR-146a表达水平，IL-6和IL-8水平升高（P<0.05）。结论：过表达miR-146a可抑制眼眶成纤维细胞中IL-6和IL-8的表达，同时抑制miR-146a可促进眼眶成纤维细胞中IL-6和IL-8的表达。

关键词：甲状腺相关性眼病，眼眶成纤维细胞，miR-146a，IL-6，IL-8

【中图分类号】R581.3    【文献标识码】A    【文章编号】2107-2306（2019）03-022-02

引言

甲状腺相关性眼病（Thyroid-associated ophthalmopathy， TAO），是一种器官特异性自身免疫性疾病[1]。眼眶成纤维细胞是甲状腺相关眼病的自身免疫靶点和效应细胞[2]。IL-6是主要的促炎细胞因子[3]。成纤维细胞中IL-8的产生参与甲状腺相关眼病炎症进展[4]。

miR-146a是典型的多功能miRNA，参与免疫调节，细胞增殖，分化，凋亡，细胞外基质代谢和其他生命过程[5]。杨文娟等[6]发现，甲状腺相关眼病患者和甲亢不伴有眼病患者的外周血单个核细胞的miRNA-146a相对表达量较正常人明显下降。然而，miR-146a对眼眶成纤维细胞中IL-6和IL-8的影响仍不清楚。本研究旨在通过原代细胞培养技术获取纯化的眼眶成纤维细胞，利用携带目的基因的慢病毒转染眼眶成纤维细胞，过表达或抑制miR-146a的表达水平，进而利用ELISA法检测IL-6和IL-8的表达水平，探讨miR-146a对甲状腺相关眼病眼眶成纤维细胞IL-6和IL-8的调节作用。

方法

1.实验材料

实验组：因暴露性角膜炎、压迫性视神经病变或限制性眼外肌病變行眼眶减压术或斜视矫正术的甲状腺相关眼病患者6例，术中取眼眶球后结缔组织。……