王景乐

摘要：脂肪酶属于丝氨酸水解酶，可以在油水界面把甘油三酯水解成甘油及脂肪酸，对于脂合成、脂水解、脂交换等众多反应具有重要的催化作用。因而，脂肪酶不仅在生物体的代谢中起重要作用，脂肪酶广泛存在于植物、动物以及微生物中。但天然的脂肪酶通常具有產量低、稳定性差等诸多缺点，无法满足工业生产的需求。因此，利用基因工程对于脂肪酶的酶学性质进行改造，提升其催化能力与反应稳定性，生产高产的脂肪酶工程菌，具有重要的意义。

关键词：脂肪酶工程菌;构建;纯化;酶学性质

中图分类号：0939.9

文献标识码：B

doi： 10.3969/j.issn.2096-3637.2019.09.028

0 引言

在许多生产领域中，催化剂都必不可少。与传统的化学催化剂相比，脂肪酶作为一种生物催化剂拥有高度催化特异性，而且其对于原料的要求低，带来的副反应少，有助于提高产品的品质。同时，利用脂肪酶作为催化剂还能起到减少产生有毒副产物和能源消耗的作用，具有广阔的应用前景。目前，脂肪酶的获得主要是通过基因工程的方法，选择合适的表达体系构建脂肪酶工程菌，并对经过改造后重组的脂肪酶进行纯化，提高其纯度，同时研究其酶学性质找到能对重组脂肪酶活性产生影响的关键因素，进而生产出能满足应用需要的脂肪酶。

1 构建与表达

目前可以作为外源性蛋白表达系统的包括酵母、动植物细胞、细菌以及昆虫细胞等。而脂肪酶作为一种活性蛋白质，用于脂肪酶工程菌的构建，脂肪酶基因的表达系统主要有大肠杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、枯草杆菌表达系统等。……