吴波涛 温安延 徐学斌 左程 陈萍萍 赵守美 单宝昌

脑血管疾病是常见的神经系统疾病，对人类身体健康有较大的威胁，高血压性脑出血是脑血管疾病的常见类型，其是由脑血管破裂后血液进入脑实质引起的自发性出血[1]。该病发病急，病情较重，大部分患者伴有神经功能障碍，致残率及病死率较高，对患者健康乃至生命产生严重危害。白细胞介素-12（interleukin-12，IL-12）、白细胞介素-27（interleukin-27，IL-27）均属于白细胞介素-12家族成员，主要由活化的单核细胞、巨噬细胞产生，可促进黏附分子、细胞因子等表达，引起继发性脑损伤[2]。补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3（C1q tumor necrosis factor-related protein 3，CTRP-3）是一种新的脂肪因子，与脂联素有高度同源性，其参与糖脂代谢、炎症反应、血管新生、细胞凋亡、心室重塑等生理过程，其可能通过发挥促血管生成作用，进而抵抗脑出血继发性损伤，但关于CTRP-3与脑出血脑损伤的相关研究很少[3]。 D-二聚体（D-dimer，D-D）是凝血功能指标之一，当发生脑出血时，血液循环障碍，凝血因子被激活，会导致凝血功能异常，因此D-D水平会异常变化。 IL-12、IL-27、CTRP-3、D-D 与脑出血的发展过程有密切关系，通过研究其水平变化，可对患者病情及预后提供参考依据。本研究主要探讨血清IL-12、IL-27、CTRP-3、D-D 水平与脑出血患者预后的相关性，现报道如下。

资料与方法

一、一般资料

选取自2016年7月至2018年5月于东营市人民医院神经外科住院治疗的106例高血压性脑出血患者为脑出血组，选取同期进行体检的健康志愿者80人为对照组。纳入标准：（1）符合2010年美国《成人自发性脑出血诊断标准》[4]；（2）经过 CT证实，有明确的神经系统定位体征；（3）均为首次出血；（4）发病24 h 以内；（5）无脑卒中史。 排除标准：（1）动脉瘤、外伤等引起的继发性脑出血；（2）合并有严重心肝肾等功能障碍；（3）急慢性感染者；（4）恶性肿瘤；（5）凝血功能障碍；（6）自身免疫性疾病；（7）妊娠期及哺乳期妇女。脑出血组患者中，男性64例，女性42例，年龄范围 43～72 岁，年龄（57.36±8.51）岁。脑出血部位：基底节出血56例，丘脑出血21例，脑叶出血18例，混合出血11例；根据GCS评分将患者分为：GCS≥13分 29例，GCS 9～12分 61例，GCS≤8分 16例；根据美国国立卫生研究院卒中量表（National Institutes of Health stroke scale，NIHSS）分为：NIHSS＞12 分 31例，NIHSS≤12分75例。根据入院后随访3个月的改良Rankin 量表（modified Rankin scale，mRs）评分对患者的预后进行评估，分为预后良好组85例（mRs评分≤2分）及预后不良组21例（mRs评分＞2分）。对照组中男性49例，女性31例，年龄范围42～73岁，年龄（57.96±9.01）岁。本研究经过医院伦理委员会批准，所有患者均签署知情同意书。2组患者性别、年龄等一般资料差异无统计学意义（P＞0.05）。

二、研究方法

脑出血组患者分别在入院后第2天清晨、治疗结束后的清晨，抽取静脉空腹血4 mL，以3000 r/min速度（离心半径10 cm），离心15 min，分离获得血清，保存于-80℃。采用酶联免疫吸附法（enzymelinked immunosorbent assay，ELISA）检测血清 IL-12、IL-27、CTRP-3，试剂盒来自美国R&D公司，D-D采用免疫比浊法检测，试剂盒来自安徽伊普诺康生物工程有限公司，检测设备为美国THERMO FISHER Multiskan FC酶标仪。同时进行GCS评分、NIHSS评分、mRs评分的评估。

三、评分标准

（1）GCS评分[5]：内容包括睁眼反应、语言反应、肢体运动3个方面，其总分为昏迷指数，满分15分，分数越低，昏迷程度越重。其中GCS≥13分为轻度昏迷，GCS 9～12分为中度昏迷，GCS≤8分为重度昏迷；（2）NIHSS 评分[6]：包括 15 个项目，意识水平、意识水平提问、意识水平指令、凝视、视野、面瘫、上肢运动、下肢运动、共济失调、感觉、语言、构音障碍、忽视症，轻型 0～15 分，中型 16～30 分，重型 31～45 分。NIHSS评分越高，神经功能缺损越严重，表示脑损伤程度越严重；（3）mRs评分：用于评价患者的残疾程度及日常生活依赖程度，分为0～6分7个等级，分数越高，患者的残疾程度和日常生活依赖程度越高。

四、统计学分析

采用SPSS19.0软件进行统计学分析，血清生化指标（IL-12、IL-27、CTRP-3、D-D）等计量资料，以均数±标准差（±s）表示，2组间比较采用两独立样本t检验，3组间均数比较采用方差分析（F检验），进一步2组间比较采用SNK-q检验；各血清生化指标与脑出血GCS评分和NISHH评分相关性分析采用Pearson相关性分析。检验水准α=0.05，以P＜0.05表示差异有统计学意义。

结 果

一、2 组患者 IL-12、IL-27、CTRP-3、D-D 水平的比较

脑出血组IL-12、IL-27、D-D水平显著高于对照组，CTRP-3显著低于对照组，2组比较差异有统计学意义（P＜0.05）（表 1）。

表1 2 组患者 IL-12、IL-27、CTRP-3、D-D 水平的比较

二、不同GCS评分、不同NIHSS评分、不同预后患者 IL-12、IL-27、CTRP-3、D-D 水平的比较

随着GCS评分降低，脑出血患者的IL-12、IL-27、D-D水平不断升高，CTRP-3不断降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；NIHSS＞12 分患者的 IL-12、IL-27、D-D水平显著高于NIHSS≤12分患者，CTRP-3显著低于NIHSS≤12分患者，差异有统计学意义（P＜0.05）； 预后良好患者IL-12、IL-27、D-D水平显著低于预后不良患者，CTRP-3显著高于预后不良患者，差异有统计学意义（P＜0.05）（表 2）。

三、各血清生化指标与脑出血患者GCS评分、NIHSS评分的相关性

经过 Pearson 相关性分析，IL-12、IL-27、D-D 与脑出血患者GCS评分呈负相关（r=-0.604、-0.611、-0.586，均P=0.000），CTRP-3与GCS评分呈正相关（r=0.594，P=0.000）；IL-12、IL-27、D-D 与 NIHSS 评分均呈正相关 （r=0.589、0.614、0.581， 均P=0.000），CTRP-3 与其呈负相关（r=-0.587，P=0.000）（图 1）。

表2 不同GCS评分、NIHSS评分及不同预后患者IL-12、IL-27、CTRP-3、D-D 水平的比较

图1 血清IL-12、IL-27、CTRP-3、D-D水平与脑出血患者GCS评分、NIHSS评分的相关性分析

讨 论

高血压脑出血是临床常见病，出血形成的血肿会因为压迫对周围神经组织造成损伤，其还可破坏血脑屏障，脑组织损伤会释放出趋化因子，进而介导大量炎症细胞聚集黏附在损伤组织，分泌的炎症因子可加重炎症反应，进一步导致神经组织损伤[7]。国外有研究表明，高血压脑出血后可释放大量炎症因子，并促进氧自由基、水解酶等神经毒性物质释放，提高白细胞黏附因子、细胞因子等表达，引起继发性脑损伤[8]。 IL-12、IL-27、CTRP-3、D-D 均与脑出血的发展过程有密切关系，本文主要研究其与脑出血患者预后的相关性，以期对患者病情及预后提供参考依据。

IL-12、IL-27是重要的炎性因子，主要生物学功能是调节自然杀伤（natural killer，NK）细胞活化、T细胞增殖以及细胞因子的分泌等[9]。IL-12可诱导NK细胞产生IFN-γ，并与其他细胞因子产生协同作用，使NK细胞产生IFN-γ的作用增强；IL-27可诱导TNF-α、IL-6、IL-8等炎性因子的表达，级联放大炎症反应[10]。史春雷[11]研究表明，老年颅脑损伤患者CT图像评分与血清中IL-12表达特征及与预后的相关。朱占胜等[12]研究表明，颅脑损伤患者存在不同程度的炎症反应，IL-27水平与颅脑损伤程度密切相关，高IL-27水平提示脑组织损伤严重，预后不良。

CTRP-3是CTRP超家族成员之一，与脂联素结构高度同源，都具有N端信号肽、C端C1q样球状结构域、中间短的可变区以及胶原样结构域，因此两者具有许多类似的生理活性，其中CTRP-3的促血管新生作用可能与脑出血患者脑损伤有关[13]。CTRP-3过表达可减轻脑出血患者脑水肿的程度，保护血脑屏障，改善神经功能。汪少华[14]研究表明，CTRP-3可能通过AMPK/HIF-1α/VEGF信号通路发挥促血管生成作用，进而抵抗脑出血继发性损伤。

D-D是一种特异性纤维蛋白降解产物，发生脑出血时，脑组织释放一系列细胞因子，激活外源性凝血系统，凝血功能增强，进一步使得纤溶亢进，导致纤维蛋白溶解[15]。李军等[16]研究表明，D-D可以反映高血压性脑出血患者的病情严重程度，可作为评估高血压脑出血预后的重要参数。

本研究结果表明，脑出血组IL-12、IL-27、D-D水平显著高于对照组，CTRP-3显著低于对照组（P＜0.05）。 说明 IL-12、IL-27、CTRP-3、D-D 与高血压脑出血有关。随着GCS评分降低，脑出血患者的IL-12、IL-27、D-D 水平不断升高，CTRP-3 不断降低（P＜0.05）。NIHSS＞12 分患者的 IL-12、IL-27、D-D 水平显著高于 NIHSS≤12分患者，CTRP-3显著低于NIHSS≤12分患者（P＜0.05）。说明患者病情越严重，昏迷程度和脑损伤程度越重，IL-12、IL-27、D-D水平越高，CTRP-3水平越低，该4项指标血清水平变化在一定程度上可以反映脑损伤的严重程度。另外，预后良好患者IL-12、IL-27、D-D水平显著低于预后不良患者，CTRP-3显著高于预后不良患者 （P＜0.05）。提示入院后 IL-12、IL-27、D-D 水平越低、CTRP-3水平越高的患者，其短期预后越好。

经过Pearson相关性分析，脑出血患者GCS评分、NIHSS 评分与 IL-12、IL-27、D-D 均呈正相关，与CTRP-3 呈负相关（P＜0.05）。提示 IL-12、IL-27、CTRP-3、D-D与脑出血患者脑损伤有密切关系，并且还可预测预后情况。分析其原因可能为脑出血患者早期机体存在全身炎症反应，可释放出多种炎性相关细胞因子，对脑部造成炎性反应损伤，其中IL-12、IL-27可促进黏附分子及TNF-α、IL-6、IL-8等炎性因子的表达，引起炎症级联反应，还可诱导NK细胞产生IFN-γ，进而激活小胶质细胞，导致神经元的凋亡，加重脑水肿及神经元损伤。CTRP-3可通过上调促血管生成因子的表达，促进脑血管生成，减轻脑水肿，保护血脑屏障，减少神经功能缺损，阻止脑出血继发性损伤。发生脑出血后，血小板被激活，凝血功能增强，局部血栓形成，纤溶酶活性提高，溶解纤维蛋白产生D-D，同时血管内皮细胞受损也会激活凝血功能，继发纤溶亢进，导致D-D水平升高。因此，通过动态监测脑出血患者 IL-12、IL-27、CTRP-3、D-D 水平变化可以反映病情的严重程度及预测预后，对临床医师的诊治有重要参考价值。

综上所述，脑出血患者 IL-12、IL-27、CTRP-3、DD水平与脑损伤程度有密切关系，可提示预后情况。但本研究样本量有限，还需进一步的大样本多临床中心研究。4种指标之间可能还存在一定相关性，共同参与脑损伤的发展过程，后续将继续研究。