杜梦潭, 刘兴健, 胡小元, 张志芳, 李轶女

中国农业科学院生物技术研究所, 北京 100081

近几十年来人类对自身基因组进行了详细探索，已经发现了数百个导致人类遗传疾病的基因，新一代测序技术的发展极大的促进了这一进程，使得很多遗传性疾病的相关基因得到了鉴定，传统的手术和药物并不能很好地治疗这些疾病。因此，基因治疗是一个正在飞速发展的学科，其通过病毒载体将正常基因导入到缺陷组织中，以替代或补偿缺陷基因的功能，达到治疗遗传性或获得性疾病的目的，其优势在于有望通过一次性方式治疗疾病，解决根本问题。因此，基因治疗相关的病毒载体也受到广泛关注，主要包括逆转录病毒、慢病毒、腺病毒、腺相关病毒以及非病毒载体，各有其优缺点[1]，其中，腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)载体因其低致命性、低免疫原性、宿主范围广泛且稳定表达等独特优势成为目前应用最为广泛的基因治疗载体。

腺相关病毒是一种无包膜包被的单链DNA缺陷型病毒，最早于1965年作为腺病毒制备物中的一种污染成分被发现[2]。目前应用于研究和临床的是重组腺相关病毒载体(recombinant adeno-associated virus，rAAV)[3]。早在1996年，Flott等[4]将囊性纤维变性跨膜基因导入人的呼吸道并获得表达且没有任何不良反应，至此，以AAV为病毒载体的基因治疗开始成为研究热点。但生产AAV载体的制造过程极其复杂，成本非常昂贵且限制因素多，成为整个行业的瓶颈，因此，急需开发更高滴度、更加经济的AAV载体制备技术，以满足今后的临床研究以及市场需求。……