文/钱娟娟

采用色谱法测定可溶性磷酸盐含量 // 由聚苯乙烯二乙烯苯树脂填装而成的Aminex HPLC柱，通过离子调节分配层析技术，在特定的色谱条件下，将可溶性磷酸盐以PO43-形式被检测出来，并用外标法定量。

磷酸盐常被作为重要的食品配料和功能添加剂，然而膳食中磷酸盐食量过多，会降低人体对钙的吸收，造成缺钙。同时，磷酸盐又是引起水体富营养化的关键因素之一，是评价水体水质的重要指标。所以对于可溶性磷酸盐的测定显得尤为重要。目前实验室广泛采用的测定磷酸盐的方法——钼锑抗分光光度法，虽然操作简单，但其络合物稳定时间短，检测限高，灵敏度低，不利于样品中微量磷的测定。

为了提高检测灵敏度，降低检测限，本方法采用由聚苯乙烯二乙烯苯树脂填装而成的Aminex HPLC 柱，通过离子调节分配层析技术（包括离子排阻、离子交换、正相和反相分配、分子量排阻和配体交换），在特定的色谱条件下，将可溶性磷酸盐（包括H2PO4-、HPO42-、PO43-）以 PO43-形式被检测出来，并用外标法定量。

表1 仪器分析条件。

表2 标准曲线的七个梯度浓度配制方法。

实验部分

仪器与试剂

1.仪器

高效液相色谱仪,分析条件，如表1所示。

2.试剂

磷酸二氢钾：GB/T 1274-2011

高纯水： MILLI-Q超纯水器制备

实验步骤

1.制作标准曲线

称取0.0266g分析纯磷酸二氢钾（99%），用适量水溶解后转移至100ml容量瓶中，定容后混匀，称为磷酸二氢钾标准母液。取7个1.5ml的离心管分别编号为 1、2、3、4、5、6、7，按表2所示，将磷酸二氢钾标准母液稀释成7个浓度梯度。

2.绘制标准曲线