文/ Frank Steiner Katherine Lovejoy

调整高效液相色谱仪的温度后会对分离的选择性产生影响 // 四种防腐剂的分离情况清楚地告诉我们，为什么用户关心的不仅是检测分析的速度还有分析的选择性。

虽然几乎所有的现代化和和自动化的高效色谱仪都有色谱柱温度控制功能，但在大多数情况下，高效色谱检测分析方案的设计中色谱柱温度并不是一个重要参数。在实验室的日常工作中，提高色谱柱温度的首先是一种降低流动相粘度的方法，其次是在流量恒定时降低色谱柱背压的方法，因此，提高柱温就是提高高效液相色谱检测分析的动力学性能。众所周知，温度提高之后不仅对色谱分析的速度有影响，而且对色谱柱中的物质滞留情况也有影响。原则上，范特霍夫方程描述了不同温度下某反应的平衡常数：

公式1中的保留因子k描述的就是与色谱柱的温度相关的系数；

式中△H0表示的是流动相和固定相之间分析物的焓变；△Hs表示的是相应的熵变；ß是表示相位关系的反应商。

图2 ：四种防腐剂在12个不同温度条件下的色谱分离图。

图1 根据公式1得出的四种防腐剂的范特霍夫色谱曲线图。

从公式中可以清楚的看出：lnk与时间1/T之间的关系是线性关系，也就是说可以通过两个检测点就确定它们之间的相互关系，但实际中，线性关系都有很好的相似性，尤其是高效液相色谱检测分析中，经常会出现出现偏差。因此，在要求严格的色谱分析中至少要采集三个检测点以上的数据，另外，应放弃利用外推法对测量范围以外的温度进行预测。……