李德宇 李 娜

郑州大学附属肿瘤医院(河南省肿瘤医院) 1 核医学科 2 手术部，河南省郑州市 450008

甲状腺癌是发病率增高最快的实体癌，90%以上的甲状腺癌为分化型甲状腺癌。大多数甲状腺癌患者经过手术治疗、碘131治疗以及甲状腺抑制治疗后有较好的预后，能够长期生存，但仍有5%～23%的患者发生远处转移，其中又有大约30%的患者在自然状态下或者治疗过程中失分化，摄碘能力丧失，发展为碘难治性分化型甲状腺癌，患者预后较差[1]。钠碘同向转运体(Sodium iodide symporter，NIS)在甲状腺摄碘过程中发挥重要的作用[2]。Oct-4是POU转录因子家族成员之一，在发育的不同时期、不同分化过程中发挥着重要的生物学功能，通过调控靶基因发挥相应的作用[3]。CD133是干细胞以及肿瘤干细胞表面特异性标记分子[4]。本文探讨碘难治性分化型甲状腺癌中NIS、Oct-4和CD133的表达水平，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2013年1月—2017年10月在我院诊断治疗的碘难治性分化型甲状腺癌患者31例为碘难治组，另选择碘治疗有效甲状腺癌患者30例为碘有效组，甲状腺结节30例为对照组。纳入标准：患者均行甲状腺全切术，病理证实诊断，甲状腺癌患者经131I治疗；所有患者临床资料完整。排除标准：合并其他系统癌症，临床资料不完整者。131I治疗有效判断方法[5]：治愈为服用131I后5～7d全身显像以及辅助影像学检查结果显示原发灶以及转移灶均消失，Tg水平持续低于2ng/ml；好转为原发灶缩小，转移灶大小和数量减少，Tg水平下降。

1.2 检测项目 NIS、Oct-4以及CD133采用免疫组化的方法检测。制作石蜡切片，HE染色，观察肿瘤细胞形态。脱蜡，抗原修复，消除内源性H2O2活性，封闭，一抗孵育，二抗孵育，DAB显色，复染，脱水，透明，封片。观察结果。NIS、Oct-4以及CD133均表达于细胞内。表达水平判断：阳性细胞数：阳性细胞比例>75%为4分，51%～75%为3分，26%～50%为2分，10%～25%为1分，<10%为0分；染色深度：深棕色或者深褐色为3分，棕黄色为2分，浅黄色为1分；阳性判断：阳性细胞数评分×染色深度评分，≥3分为阳性，<3分为阴性。

1.3 分析方法 比较三组NIS、Oct-4以及CD133阳性率及阳性积分。

1.4 统计学方法 采用SPSS15.0统计学软件对数据进行分析，计数资料采用χ2检验，计量资料采用均数±标准差表示，采用F检验及t检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组CD133阳性率及阳性积分比较 见表1。CD133表达在甲状腺滤泡细胞、癌细胞胞浆以及细胞膜上。对照组无CD133阳性表达。碘难治组CD133阳性率显著高于碘有效组，差异有统计学意义(χ2=5.908，P=0.015)；碘难治组CD133阳性积分显著高于碘有效组，差异有统计学意义(t=25.735，P=0.000)。

表1 碘难治组与碘有效组CD133阳性率及阳性积分比较

2.2 三组NIS阳性率及阳性积分比较 见表2。NIS表达在甲状腺滤泡胞浆内，未见细胞核有表达。碘有效组与对照组NIS阳性率均为100%，显著高于碘难治组，差异有统计学意义(χ2=21.999、21.999，P=0.000)；碘有效组与对照组NIS阳性积分显著高于碘难治组，差异有统计学意义(t=16.162、16.167，P=0.000)；碘有效组与对照组NIS阳性积分比较差异无统计学意义(t=1.145，P=0.257)。

表2 三组NIS阳性率及阳性积分比较

2.3 三组Oct-4阳性率及阳性积分比较 见表3。Oct-4在甲状腺滤泡细胞与癌细胞的细胞核，未见胞浆表达。对照组无Oct-4阳性表达。碘难治组与碘有效组Oct-4阳性表达率均为100%；两组Oct-4阳性积分比较差异无统计学意义(t=0.557，P=0.579)。

表3 碘难治组与碘有效组Oct-4阳性率及阳性积分比较

3 讨论

大多数的甲状腺癌患者可以通过手术治疗、放射性碘治疗、TSH抑制获得长期无疾病生存，但仍然有一部分患者肿瘤细胞的形态以及功能发生退化，出现摄碘能力下降甚至丧失，称为碘难治性甲状腺癌，患者治疗效果差，预后差，平均生存期缩短。分化型甲状腺癌多用分子水平改变导致摄碘功能下降是碘难治性分化型甲状腺癌的主要发生机制[6]。碘突变以及染色体重组在甲状腺癌的发生及发展过程中发挥了决定性的作用，这些改变激活MAPK以及磷脂酰肌醇-3-激酶信号通路上的多个靶点，导致细胞增殖、异常、癌变、摄碘能力下降。

NIS位于甲状腺滤泡细胞基底细胞膜上，在摄碘过程中发挥重要的作用，在有Na+的条件下，NIS可转运碘离子等一些单价阴离子，但对碘离子的转运作用最强，从而发挥摄碘功能。在正常的甲状腺组织中，NIS主要分布在少数紧靠着毛细血管的滤泡细胞基底细胞膜上，在自身免疫性甲状腺炎中期分布情况与正常情况相当，在弥漫性结节性增生的甲状腺组织中，分布增加，在高分化的甲状腺癌中分布减少，在低分化的甲状腺癌中更少甚至缺失[7-8]。在本文中，碘治疗有效患者以及对照组NIS阳性率为100.00%，而碘难治性分化型甲状腺癌的阳性率为41.94%，显著下降，对三组的阳性积分比较，碘难治性分化型甲状腺癌患者积分也显著下降。这个结果提示NIS分布下降可能是导致碘治疗效果差的重要机制之一。

Oct-4是POU转录因子家族中的重要成员。POU家族成员有一个保守的POU结合域，其能够结合八聚体模体而发挥调节基因转录的作用。目前的研究认为在恶性肿瘤中共有一定数量的肿瘤干细胞，这类细胞无限增殖，在肿瘤的发生及发展过程中发挥重要的作用[9]。Oct-4是胚胎干细胞的标志物，其表达改变是干细胞分化状态发生改变的标志，维持干细胞未分化状态，调节干细胞分化过程，维持细胞多功能状态。目前的研究证实其在肿瘤的起源中发挥重要的作用，其基因的异常表达可导致正常细胞恶化。在本文中，难治性分化型甲状腺组以及碘治疗有效的甲状腺癌患者Oct-4阳性率均达到100%，而对照组无阳性表达，这个结果提示Oct-4在甲状腺癌的发生及发展过程中也发挥了重要的作用，并不是导致碘治疗无效的相关机制，但其可以作为碘难治性分化型甲状腺癌治疗的靶点。

CD133最早从造血干细胞中分离，CD133蛋白是细胞膜蛋白超家族中的医院，含有至少9个不同的非翻译区外显子，其表达具有组织依赖性，在分化细胞中表达下调。CD133也是肿瘤干细胞特异性表面分子标志物，目前的研究证实在多种癌症中CD133有阳性表达，例如胰腺癌、结肠癌、肝癌，这些由CD133标记的肿瘤干细胞在体外环境中具有自我分化、更新、克隆、增殖的能力，越来越多的证据证实CD133可能是肿瘤干细胞表面特异性表达的分子，提示其可以作为抗肿瘤治疗的新靶点[10]。在本文中对照组无CD133治疗，碘治疗有效组阳性率低于碘难治组，阳性积分也显著低于碘难治组，这提示CD133在甲状腺癌的发生及发展过程中发挥了一定的作用，并且也可能是摄碘功能下降甚至丧失的机制抑制，可以作为碘难治性分化型甲状腺癌的新的治疗靶点。

综上所述，NIS在碘难治性分化型甲状腺癌中表达缺失，可能是碘治疗无效的机制之一；CD133在碘难治性分化型甲状腺癌中表达升高，可能参与了摄碘功能的下调，可以作为治疗新靶点；Oct-4在碘治疗有效的甲状腺癌以及碘难治性分化型甲状腺癌表达率均达到了100.00%，虽然可能不是碘治疗无效的机制，但可以作为碘难治性分化型甲状腺癌的治疗靶点。