赵丽华，尹宏磊，吕风华，张素荣，郭长磊，张培勇

心肌梗死是一种常见的心血管系统疾病，恢复冠状动脉（冠脉）血液流通是治疗心肌梗死的直接途径[1]。恢复冠脉血液流通后有时不仅不能够恢复心脏功能，反而会加重心肌组织损伤，引起心力衰竭，称为心肌缺血再灌注损伤[2,3]。当血液恢复流通后，随着血液流入的氧会引发氧化应激，促进心肌细胞凋亡[4]。Wnt参与细胞分化、增殖、凋亡等生物学过程，属于胞外细胞因子家族，其包含经典Wnt信号通路和非经典Wnt信号通路[5]。经典Wnt信号通路参与心肌缺血再灌注损伤的发生，而对于非经典的Wnt信号通路Wnt5a的研究较少[6]。近年来的研究表明，Wnt5a在心肌缺血再灌注心肌组织中表达上调[7]。本研究以缺氧复氧心肌细胞为研究对象，通过小干扰RNA技术干扰心肌细胞中Wnt5a的表达，探讨Wnt5a对缺氧复氧心肌细胞氧化损伤的影响，以期为探讨Wnt5a在心肌缺血再灌注发病机制中的作用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 细胞心肌细胞HCM购自于美国ATCC。

1.2 材料超氧化物歧化酶（SOD）含量检测试剂盒购自于上海贤绵生物科技有限公司；活性氧（ROS）含量检测试剂盒购自于南京建成生物工程研究所；丙二醛（MDA）含量检测试剂盒购自于武汉默沙克生物科技有限公司；二喹啉甲酸（BCA）蛋白定量检测试剂盒购自于美国Thermo；Wnt5a多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记的二抗均购自于美国abgent；Wnt5a小干扰RNA（Wnt5a siRNA）和小干扰RNA阴性对照（siRNA control）购自于美国origene；Wnt5a、甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）引物由南京金斯瑞生物科技有限公司合成；……