石 彪，孙建利，许再超，李艳兵，杜金龙，孙晓光，党翠玲

(承德市中心医院 1急诊外科， 2生殖医学科， 河北 承德 067000)

急性胰腺炎是一种严重危害人类生命健康的疾病，其发生机制与胰腺腺泡细胞过度凋亡有关。雨蛙肽(caerulein)是常用的构建急性胰腺炎模型诱导因子，具有很强的刺激胆囊收缩和分泌胰酶的作用，雨蛙肽可以诱导细胞内胰酶的活化，促进凋亡有关蛋白的表达，从而诱导胰腺腺泡细胞凋亡[1-2]。β-连环蛋白(β-catenin)主要存在于细胞膜上，参与细胞之间的黏附及基因的表达转录过程，在内皮细胞和成骨细胞等各种类型的细胞中广泛表达，β-catenin具有调控细胞的生长和凋亡等作用，在人类的多种疾病中异常表达[3-5]。最近的研究表明，β-catenin可能具有促进人胰腺腺泡细胞损伤后修复作用[6]。本次实验研究用雨蛙肽处理胰腺腺泡细胞，明确β-catenin在胰腺炎腺泡细胞凋亡中的作用，为明确胰腺炎腺泡细胞损伤机制奠定基础。

材 料 和 方 法

1 材料

大鼠胰腺腺泡AR42J细胞购自中科院上海细胞生物学研究所细胞库。pcDNA3.1-β-catenin由吉满生物科技(上海)有限公司构建；雨蛙肽购自Sigma；抗β-catenin抗体购自Santa Cruz Biotechnology；Lipofectamine 2000购自Thermo Fisher Scientific；cDNA合成试剂盒和real-time PCR试剂盒购自TaKaRa；抗CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein，CHOP)抗体和抗cleaved caspase-12抗体购自 Cell Signaling Technology；乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)含量检测试剂盒和淀粉酶(amylase，AMY)含量检测试剂盒购自南京建成生物研究所。

2 方法

2.1细胞分组 AR42J细胞分成对照(control)组、caerulein组、pcDNA3.1+caerulein组和pcDNA3.1-β-catenin+caerulein组，共4组。处理方法如下：cae-rulein组：用不做转染处理的AR42J细胞经含有1×10-8mol/L雨蛙肽细胞培养液处理培养24 h；pcDNA3.1+caerulein组：收集稳定转染阴性对照pcDNA3.1的AR42J细胞，用含有1×10-8mol/L雨蛙肽细胞培养液处理培养24 h；……