梁木林，党红星，鲁 雪，方 芳，刘成军，许 峰

(重庆医科大学附属儿童医院重症医学科， 儿童发育疾病研究教育部重点实验室, 儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地， 儿科学重庆市重点实验室， 重庆 400014)

高体积分数氧(高氧，hyperoxia)长时间持续吸入可引发儿童肺损伤[1]，高氧诱导的肺损伤在组织学上可分为急性期和慢性纤维化期2个阶段，2者的病理改变不同，即早期肺组织表现为炎症渗出和水肿，晚期则表现为肺泡明显增厚和成纤维细胞增生[2]。肺损伤纤维化发生的主要机制是炎症损伤和损伤后异常修复[3]，但纤维化进展的机制尚不完全清楚，仍然缺乏有效手段干预纤维化[4]。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，mTOR)信号通路参与调节细胞的存活与增殖，抑制mTOR对肺损伤及纤维化有潜在的治疗作用[5]。本研究以3周龄SD幼鼠为研究对象，复制高氧肺损伤动物模型，探讨mTOR复合物1(mTOR complex 1, mTORC1)抑制剂雷帕霉素(rapamycin,Rapa)和mTORC1/2双重抑制剂OSI-027抑制mTOR信号通路对高氧肺损伤时磷酸化AKT1(phosphorylated AKT1,p-AKT1)分子的影响及其在高氧肺损伤纤维化中的作用。

材 料 和 方 法

1 实验动物

清洁级SD幼鼠(体重44.8 g±2.75 g，雌雄不限，3周龄)，由重庆医科大学实验动物中心提供，许可证编号为SCXK(渝)2018-0003,敷料、饲料和水源由重庆医科大学附属儿童医院动物房统一供应。本研究经重庆医科大学实验动物伦理委员会伦理审核批准。

2 主要试剂

抗兔p-AKT1单克隆抗体(批号ab81283)、抗兔磷酸化核糖体蛋白S6激酶1(phosphorylated ribosomal protein S6 kinase 1, p-S6K1)多克隆抗体(批号ab131436)、抗鼠β-actin单克隆抗体(批号ab8226)、生物素化山羊抗鼠IgG(H+L)(批号ab6789)及生物素化山羊抗兔IgG(H+L)(批号ab6721)均购自Abcam；……