李德荣，刘云龙，王 翔，孙 焱，康珏宁，刘 权， 何子奇，陶芝伟，关晓峰，邓耀良, 2△

(广西医科大学 1第一附属医院泌尿外科, 2附属琅东医院泌尿外科， 广西 南宁 530021)

草酸钙肾结石以其高发病率和高复发率被研究者重视[1-2]，然而到目前为止，草酸钙肾结石形成的机制仍不明确。研究表明，自噬在肾脏疾病的发生发展过程中起到重要的作用[3-4]。自噬是一种在营养缺乏和氧化应激时，细胞利用溶酶体降解自身受损的细胞器和大分子物质的过程，在维持细胞内环境的稳定方面发挥重大作用。自噬已广泛涉及肿瘤、神经退行性疾病、心血管疾病及衰老等多种病理生理过程[5-6]。自噬在疾病过程中的作用越来越引起人们的关注，然而，自噬在肾结石形成中的作用仍不明确。本研究拟通过乙二醇诱导建立大鼠草酸钙肾结石模型，首先检测大鼠肾脏内自噬水平的变化，然后通过应用自噬调节剂和抗氧化剂，探讨自噬在大鼠草酸钙肾结石形成中的作用及其机制，为草酸钙肾结石的防治提供新的策略。

材 料 和 方 法

1 动物

40只雄性SPF级SD大鼠，体质量180～220 g，由广西医科大学实验动物中心提供,许可证号SCXK(桂)2014-0002。

2 主要试剂

氯喹(chloroquine,Chlo)、雷帕霉素(rapamycin,Rapa)和N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine，NAC)(Sigma)；兔抗LC3B多克隆抗体(Cell Signaling Technology)；BCA 蛋白浓度测定试剂盒和钙盐染色Von Kossa硝酸银法(北京索莱宝)；总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase，T-SOD)试剂盒和谷胱甘肽过氧物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)试剂盒(南京建成)；大鼠肾损伤分子1 (kidney injury molecule 1，Kim-1)和大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin，NGAL) ELISA试剂盒(武汉华美生物)。……