Galectin-9调控SHH信号通路影响结直肠癌HT29细胞凋亡*
2019-03-21唐亚萍陈琳琳王淳阅
赵 鑫,唐亚萍,陈琳琳,王淳阅,叶 峰△
(1厦门大学附属第一医院肿瘤内科, 福建 厦门 361000; 中南大学湘雅医院 2消化内科, 3肝胆外科, 湖南 长沙 410008)
结直肠癌是一个全球范围内的健康问题,其发病率和死亡率较高,随着结直肠癌早期诊断和治疗方法的不断进步,结直肠癌患者的生存率得到显著提高,但是由于结直肠癌发展速度快、恶性程度极高,其仍然严重威胁人类健康,探讨结直肠癌发病机制对于结直肠癌的治疗具有重要意义[1]。Sonic Hedgehog(SHH)信号通路是一种与肿瘤发生有关的信号转导通路,其在肿瘤组织中过度激活,抑制其激活后可以降低肿瘤细胞的生长速度,并诱导其凋亡[2]。半乳糖凝集素9(galectin-9)在人类的脾脏、外周血淋巴细胞和胸腺等免疫组织及胃和肝脏等内胚层起源组织中广泛表达。多项研究表明,galectin-9在正常组织中的表达水平高于肿瘤组织,如结直肠癌和乳腺癌等。在卵巢癌中的研究显示,galectin-9高表达可以诱导肿瘤细胞凋亡,其在卵巢癌中发挥抑制作用[3-5]。Galectin-9在结直肠癌细胞凋亡中的作用目前尚不明确。本实验用结直肠癌HT29细胞作为体外研究对象,初步探讨galectin-9对结直肠癌细胞凋亡的调控作用及机制,为明确结直肠癌的发病机制奠定基础。
材 料 和 方 法
1 材料
结直肠癌细胞系HT29购自上海素尔生物科技有限公司;pcDNA3.1-Galectin-9由上海吉玛制药技术有限公司构建;Lipofectamine 2000购自Invitrogen;PCR和cDNA合成试剂均购自Thermo Fisher;引物由生工生物工程(上海)股份有限公司合成;抗galectin-9抗体购自BioVision;抗cleaved caspase-3、Smo、Gli1和SHH抗体购自ABGENT;SHH信号通路特异性抑制剂cyclopamine购自上海瀚香生物科技有限公司。……
