潘 磊，胡梦奕，李 赛，陈培丰，尹利明△

(1浙江中医药大学附属第一医院， 浙江 杭州 310006； 2宁波市中医院， 浙江 宁波 315010)

蛇六谷是天南星科魔芋属的多年生草本植物的统称，又名魔芋，亦称蒟蒻、蒻头和由跋等。经考证[1-2]，浙江地区药用“蛇六谷”为花魔芋的块茎。据《中药大辞典》记载，本品性寒，味辛、苦，内服有化痰消积、解毒散结和行瘀止痛的功效，外用可解毒消肿，治疗淋巴结结核、丹毒、跌打损伤、烫火伤和蛇咬伤等。现代广泛用于治疗各种恶性肿瘤，认为其有软坚散结、清热解毒抗肿瘤的功效。我们前期筛选并研究发现蛇六谷提取物(the extract from tuber ofAmorphophalluskonjac，TuAKe)具有抑制胃癌增殖的作用[3]，且能够诱导胃癌细胞发生自噬[4]，但是机制并不明确。Beclin-1基因又称BECN1基因，是自噬信号通路的重要调节基因[5]。本研究重点探讨beclin-1基因及在蛇六谷提取物抑制人胃癌SGC-7901细胞活力的作用。

材 料 和 方 法

1 材料

人胃腺癌细胞株SGC-7901购自中国科学院上海细胞生物学研究所。慢病毒载体GV112由上海吉凯生物科技有限公司提供。DMEM 培养基购自Gibco；胎牛血清购自杭州四季青公司；CCK-8试剂盒购自碧云天生物技术有限公司；抗beclin-1和LC3抗体购自Cell Signaling Technology; 凋亡试剂盒购自Invitrogen； 抗GAPDH抗体购自联科生物技术有限公司。

蛇六谷提取物由浙江中医药大学药物研究所提供，具体操作如下：取蛇六谷饮片100 g，剪成粗颗粒，用8倍体积95%乙醇浸泡过夜，回流提取2次并负压浓缩，2倍体积石油醚萃取2次，再次负压浓缩，真空干燥即为蛇六谷石油醚萃取物(蛇六谷提取物)。

2 方法

2.1制备GV112-beclin-1-shRNA慢病毒载体 GV112慢病毒载体购自上海吉凯基因化学技术有限公司。……