刘菲 张云涛 马向瑞 张雅杰 王云浩 .滨州医学院口腔医学院 滨州 56600；

2.滨州医学院附属医院口腔修复科 滨州 256600；

3.滨州医学院附属医院口腔颌面外科 滨州 256600

钛及钛合金被广泛应用于口腔种植治疗中，通过表面改性提高钛及钛合金种植体与骨的结合，是目前研究的热点。生物化修饰种植体可使种植体表面具有生物活性，使之形成与天然骨相似的结构与组成，从而调控细胞行为，可促进种植体与骨结合，增强骨结合强度，从而缩短种植体早期负载的时间。

精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸（arginyl-glycylaspartate，RGD）多肽是细胞膜整合素的特异性配体，与相应细胞膜上的整合素亚基识别并与之结合，从而形成特异性的黏附，同时可激活相关基因，促进细胞黏附、增殖、分化及相关基因的表达[1]。

本实验采用层层自组装技术，用RGD多肽修饰纯钛表面，可使带有相反电荷的不同电解质在材料表面相互交替吸附、沉积，从而在钛片表面形成具有特定厚度的多层自组装多肽复合薄膜[2]，在复合薄膜表面进行成骨细胞培养，检测细胞的黏附、增殖以及骨钙素和骨保护素的表达。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 实验钛片 1）TA4钛片（成都海利华生物科技有限公司），直径15 mm，厚1 mm，粗糙度为（0.20±0.02）μm。丙酮、75%乙醇、纯水中超声清洗各15 min，60 ℃干燥。2）NaOH处理钛片，将清洁后干燥试件浸没在5 mol·L-1NaOH溶液中60℃水浴24h，在80℃去离子水中保温24h，60 ℃干燥备用。

1.1.2 RGD多肽涂层的制备 将NaOH处理后的钛片浸入2.5 mg·mL-1聚乙烯亚胺（polyethyleneimine，PEI；Sigma公司，美国）水溶液中30 min，去离子水冲洗20 min；干燥后浸入含0.2 mg·mL-1RGD多肽的0.4 mg·mL-1NaHCO3溶液8h，去离子水冲洗20 min，60 ℃干燥；……