胡银亨 梁丽静

摘要：基于对长江上游经济鱼类黄颡鱼寄生车轮虫的调查研究，采用国际统一的干银法染色显示车轮虫的附着盘结构和口围绕度，采用瑞氏-姬姆萨染色以显示细胞核结构，并用Lom（1958）倡导的“统一的特定方法”进行测量，采用Bassion和van As提供的方法描述车轮虫齿体。在黄颡鱼鳃涂片上发现2种车轮虫，分别是新种黄颡鱼三分虫（Tripartiella fulvidraco sp. n.）和我国首记录种微小车轮虫（Trichina minuta）。

关键词：黄颡鱼;黄颡鱼三分虫;直齿三分虫;微小车轮虫;小车轮虫

中图分类号： S941.5  文献标志码： A  文章编号：1002-1302（2019）22-0204-05

1973年，陈启流在对黄颡鱼寄生车轮虫的研究中，发现其鳃上的粗棘杜氏车轮虫（Trichodina domerguei f.）和中华杜氏车轮虫（T.domerguei f.sinensis）[1]（粗棘杜氏车轮虫是杜氏车轮虫T.domerguei的同种异名[2]），1984年发现了寄生于黄颡鱼的卵形车轮虫（T. oviformis）（卵形车轮虫是鳞三分虫的同种异名[2]）、黑色车轮虫（T.nigra）和眉溪小车轮虫（Trichodinella myakkae）[3][眉溪小车轮虫为流行小车轮虫（T.epizootica）的同种异名[4]]。笔者于2014年在黄颡鱼鳃上发现流行小车轮虫[4]，2015年又发现了黄颡鱼车轮虫（Trichodina fluvidraco）、指状三分虫（Tripartiella dactylodentata）和矮小三分虫（Tripartiella nana）[5]。同时，笔者在对2009年采集的黄颡鱼鳃涂片用显微镜检查时，又发现了新种黄颡鱼三分虫，在2018年采集的黃颡鱼鳃涂片上发现了我国首记录种微小车轮虫（Trichina minuta）。

1 材料与方法

寄主黄颡鱼2009—2018年采集于四川省泸州市江阳区，采用寄主的鳃作涂片、自然干燥后，使用国际统一干银法染色[6]以显示车轮虫的附着盘结构和口围绕度，采用瑞氏-姬姆萨染色显示细胞核结构。染色的涂片自然干燥后，再用高浓度乙醇脱水，采用中性胶封片制成永久装片。并用凤凰PH50-3A43L-A显微镜观察，借助MC-D500U（C）在100倍油镜下拍摄显微照片。车轮虫形态学特征的描述依据Lom倡导的“统一的特定方法”（Uniform Specific Characteristic System）[7]进行，车轮虫附着盘中的齿体定位描述则依据Basson和van As提供的从车轮虫附着盘中央引线至齿钩边缘的“定位描述法”[8]进行。由图1可知，齿体定位图借助于CorelDraw X6绘制。采用CorelDraw X6的标注工具测量数据[9]，用Microsoft Excel 2010统计数据，一般数据统计模式为Min～Max（x±s），即最小值～最大值（平均值±标准差），幅线数和齿体数统计模式为Min～Max（Mode），即最小值～最大值（众数）。

小核相对于大核的位置，采用Lom引用的Dogiel提出的标准[7]，即+y位：小核在大核一臂的外侧;-y位：小核在大核臂端的对立侧面;-y1位：小核在大核一臂的内侧。

2 结果与分析

2.1 黄颡鱼三分虫新种

2.1.1 分类

门：纤毛门（Ciliophora）

纲：寡膜纲（Oligohymenophora）

目：缘毛目（Peritriehia Stein）

科：车轮虫科（Trichodinidae）

属：三分虫属（Tripartiella）

种：黄颡鱼三分虫新种（Tripartiella fulvidraco）

寄主：黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）

寄主科：科（Bagridae）

寄生部位：鳃

采集时间：2009年5月

采集地：中国四川泸州（28°51′20.41″N，105°23′25.43″E）

模式种：正模标本LZY201/2009，副模标本LZY203/2009存放于泸州职业技术学院生物学实验室。

命名说明：以寄主黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）种名fulvidraco命名。

2.1.2 描述 小型车轮虫，由图2可知，虫体直径16.0～19.5（17.7±1.3） μm，附着盘直径13.6～17.0（15.4±1.2） μm，齿环直径6.2～10.5（8.5±1.2） μm，缘膜1.0～2.7（1.8±1.0） μm，辐线数3～4（4）根/齿体，齿体数20～24（22）个。齿体纵长3.1～7.2（5.5±1.1） μm，齿长1.4～5.1（3.1±1.0） μm，齿钩长0.4～5.6（3.5±1.3） μm，齿锥宽 0.1～3.9（0.7±0.9） μm，齿棘长0.1～2.4（1.3±0.5） μm。口围绕度185.6°～191.8°（188.7°±3.1°）。小核相对于大核的位置-y1位，即小核在大核一臂的内侧。

齿钩外切缘钝圆、高于骨突、个别外切缘呈直线。齿钩前缘和其他三分虫不同，齿钩凸点（齿钩最前端）位于齿钩前缘和齿钩外切缘交界处，齿钩前缘向下向后凹曲，再向下向前后急转，形成1个约60°钩突，钩突2不明显。齿钩后缘从外切缘向下向前弯曲，然后向后弯曲（突起），此处突起看作齿钩后突起，齿钩后突起发达，齿钩后缘再向前弯曲，在接近y轴时急转向后，形成约45°角，与前缘钩突下面部分形成齿钩连接，与齿锥相连。齿锥在y轴和y-1轴约1/2处。齿锥x轴上锥和x轴下锥基本相等。齿棘较粗、顶点钝圆、无棘突，齿棘主要位于y轴和y-1轴内，指向稍偏y-1轴，与y轴呈约10°左右夹角（图3）。

2.1.3 讨论 Lom于1959年在车轮虫科中创建三分虫属（Tripartiella Lom，1959）[10]，并将以前发表的具有本属特征的车轮虫的种重命名放入该属中。目前为止，世界范围内发现的在淡水鱼类外寄生三分虫有近20种。本属的种存在许多同种异名，下面进行整理和澄清，有同种异名者，以第1个正确命名为准。本属有以下种：

（1）鳞三分虫Tripartiella bulbosa（Davis，1947） Lom，1959[10]，以下种为同种异名[2]（syn）：Trichodina bulbosa，1947（球形车轮虫）;Cyclochaeta leucisci Suzuki，1950（雅罗鱼环毛虫）;Trichodina ovaliformis Chen，1955（卵形车轮虫）;Trichodinella（Tripartiella） bubosa Lom，1959（球形小车轮虫/三分虫）;Tripartiella bubosa Stein，1962（球形三分虫）;Trichodina leucisci（Suzki，1950） Stein，1968（雅罗鱼车轮虫）;Tripartiella tilapiae Duncan，1977（罗非鱼三分虫）;以下种也是鳞三分虫syn[11]：T. lechridens Basson & van As，1987[12]（斜齿三分虫）;T.macrosoma Basson & van As，1987[12]（大型三分虫）;T. leucisci（Suzuki，1950） Lom & Haldar，1977[13]（雅罗鱼三分虫）。

（2）牛状三分虫T.bursiformis（Davis，1947） Lom，1959[10]，syn[2]：Trichodina bursiformis Davis，1947（帽形车轮虫）。

（3）铲形三分虫T.spatula van As & Basson，1986[14]，syn[11]：棒齒三分虫T. clavodonta Basson & van As，1987[12]。

（4）钝形三分虫T.obtusa Lom，1959[10]，Paratrichodina notopterlae Saha，Bandopadhyay & Haldar，1995[15]（弓背鱼拟车轮虫）具有钝形三分虫特征，是钝形三分虫的同种异名。

（5）丰富三分虫T. copiosa Lom，1959[10]。

（6）三分虫T. lata Lom，1963[16]。

（7）卡氏三分虫T. kashkovskyi Lom & Haldar，1977[13]。

（8）鸫形三分虫T. cichlidarum Basson，van As & Paperna，1983[17]。

（9）小棘三分虫T. leptospina Basson & van As，1987[12]。

（10）直齿三分虫T. orthodens Basson & van As，1987[12]。

（11）矮小三分虫T. nana Basson & van As，1987[12]。

（12）指状三分虫T. dactylodentata Al-Rasheid et al. 2000[18]。

（13）非洲攀鲈鱼三分虫T. ctenopomae Basson & van As，2002[19]。

（14）细梳攀鲈鱼三分虫T.microctenopomae Basson & van As，2002[19]。

鲫三分虫T. carassii（Dogiel，1940） Lom，1959后来归类到流行小车轮虫，小三分虫T. minuta Chen，1956缺失银染标本，描述不完整，还需要进一步研究和重新描述[2]。

在我国发现的淡水鱼寄生的三分虫有：鳞三分虫[20]（syn：球形车轮虫[21]、卵形车轮虫[3]大型三分虫[20，22-23]）、牛状三分虫（syn：帽形车轮虫[3]）、直齿三分虫[24]、指状三分虫和矮小三分虫[5]。

在所有三分虫中，几乎没有和黄颡鱼三分虫（Tripartiella fulvidraco sp. n.）相似的车轮虫。它和直齿三分虫（T.orthodens Basson & van As，1987）略为相似，直齿三分虫是Basson和van As 1987年在南非的伦氏罗非鱼（Tilapia rendalli swierstrai）鳃上发现的[12]。2种车轮虫的差异很大，特别是齿体形态上（图3）。从齿钩形态上看，二者完全不一样，黄颡鱼三分虫的齿钩宽大，而直齿三分虫的狭长，黄颡鱼三分虫齿钩最前端在齿钩外切缘和齿钩前缘交界处，而直齿三分虫的在钩突处，黄颡鱼三分虫的齿钩钩突在y轴和y+1轴约1/2处，而直齿三分虫的超过y+1轴，黄颡鱼三分虫的齿钩连接短，而直齿三分虫的狭长;二者的齿棘顶点指向，黄颡鱼三分虫略偏向y-1轴，与y轴呈约10°夹角，而直齿三分虫的触及y-1轴，与y轴呈约22°夹角。口围绕度，黄颡鱼三分虫185.6°～191.8°，直齿三分虫215°～270°。

黄颡鱼三分虫比直齿三分虫小，在同批标本中，比指状三分虫、矮小三分虫都还要小，在测量的数据上非常明显，如黄颡鱼三分虫和直齿三分虫：虫体直径16.0～19.5 μm vs. 27.6～

36.5 μm，附着盘直径13.6～17.0 μm vs. 26.0～48.0 μm，齿环直径 6.2～10.5 μm vs. 12.8～16.3 μm;黄颡鱼三分虫和指状三分虫：虫体直径16.0～17.4 μm vs. 19.0～25.2 μm，附着盘直径13.6～15.0 μm vs. 23.0～31.7 μm，齿环直径6.2～10.5 μm vs. 17.1～26 μm;黄颡鱼三分虫和矮小三分虫：虫体直径16.0～17.4 μm vs. 19.9～20.6 μm，附着盘直径13.6～15.0 μm vs. 16.2～18.7 μm，齿环直径6.2～10.5 μm vs. 16.2～18.7 μm。其他测量数据差异也非常大（表1）。

在这批标本中原来发现了黄颡鱼车轮虫、指状三分虫和矮小三分虫，黄颡鱼车轮虫为新种车轮虫，指状三分虫和矮小三分虫为我国首记录种[5]。黄颡鱼三分虫太小，以至于在显微镜下多次镜检都没有被发现。在目前发现的三分虫中，黄颡鱼三分虫是最小的三分虫之一，在低倍显微镜下根本观察不到[（5～16）×10倍]，在高倍显微镜下[（5～16）×40倍]几乎看不到，在油镜下（10×100倍）才能观察到，在同一张涂片标本中，明显看出它比指状三分虫小许多（图4）。

综合上述，黄颡鱼三分虫与直齿三分虫和其他三分虫有显著区别，是新种三分虫。

2.2 微小车轮虫

2.2.1 描述 小型车轮虫。由图5可知，虫体直径37.9～45.7（41.8±3.4） μm，附着盘直径30.9～35.1（33.7±1.7） μm，齿环直径19.8～21.6（20.6±0.7） μm，缘膜1.9～5.3（4±1.3） μm，辐线数6～7（7）根/齿体，齿体数24～25（24）个。齿体纵长9.8～10.5（10.1±0.3） μm，齿长4.0～5.2（4.7±0.4） μm，齿钩长4.5～5.5（5±0.4） μm，齿锥宽1.3～2.2（1.6±0.3） μm，齿棘长2.9～4.0（3.5±0.4） μm。

口围绕度400.0°～415.1°（408°±2.2°），小核相对于大核的位置-y1位，即小核在大核一臂的内侧。

齿钩形态近似矩形，齿钩外切缘近似直线，齿钩前缘和后缘走向几乎平行，齿钩凸点略超过y+1轴，钩突不明显。齿锥在y轴和y-1轴约1/3处，齿锥x轴上锥和x轴下锥基本相等。齿棘位于y轴和y+1轴内，齿棘顶点接近y+1轴（图6）。

2.2.2 讨论 微小车轮虫（Trichodina minuta）是Basson，van As和Paperna，1983年在南非的莫桑比克罗非鱼（Oreochromis mossambicus）的鳍、鳃和皮肤上发现的[25]，1992年van As和Basson南非的长丽鱼鳃和皮肤上发现了该车轮虫[26]。本种与它的齿体基本相同，由图6可知，较之寄生于莫桑比克罗非鱼的微小车轮虫外切缘略短而较钝、齿钩前缘略超过y+1轴。测量数据基本一致，较之寄生于莫桑比克罗非鱼的微小车轮虫稍大，见表2。

1956年，陈启鎏在鲢和鳙鳃上发现一小型车轮虫，定名为微小车轮虫（T.minuta Chen，1956）[21]，但缺乏可比较的银染标本及非国际统一标准描述，此车轮虫须重新研究和描述，其口围绕度及齿体形态符合三分虫属的定义[2]，而非微小车轮虫T.minuta Basson，van As & Paperna，1983种。除南非外，世界上其他地方仍未发现微小车轮虫（T.minuta Basson，van As & Paperna，1983）的记录。微小车轮虫T.minuta Basson，van As & Paperna，1983是我国的首记录车轮虫种，黄颡鱼是微小车轮虫的首记录寄主。

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