黄亚雨，涂海健，郑磊

(1 南方医科大学，广州 510515；2南方医科大学附属莆田医院;3 南方医科大学南方医院)

肺炎克雷伯菌常寄居于人体或动物的皮肤、上呼吸道和肠道等部位，是院内感染的重要致病菌之一。近年来，亚胺培南等碳青霉烯类抗菌药物在临床中使用广泛，导致肺炎克雷伯菌对包括碳青霉烯类药物在内的几乎所有β-内酰胺类抗菌药物产生耐药，肺炎克雷伯菌是检出率最高的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌[1]。2012年涂海健等[2]报道，耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)在该院检出的多重耐药肺炎克雷伯菌中所占比例高达11.81%(30/254)。在希腊和以色列两个国家先后出现过CRKP暴发流行情况[3]。我国的产碳青霉烯类酶的肺炎克雷伯菌是2007年由浙江大学Wei等[4]首先发现的。本研究对莆田学院附属医院收集的33株CRKP菌株进行药敏试验、改良Hodge试验、EDTA纸片协同试验、碳青霉烯类耐药基因及细菌膜孔蛋白基因检测、基因分子分型及同源性分析，旨在明确耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药机制，为临床使用抗菌药物及采取预防性措施提供依据。

1 材料

菌株：收集莆田学院附属医院2016年2月～2017年2月临床分离的CRKP 33株，其中来自重症监护病区17株、呼吸内科病区7株、神经外科3株、神经内科2株、心胸外科2株、泌尿外科及肝胆外科各1株。所有菌株经法国生物梅里埃VITEK-Ⅱ compact自动分析仪鉴定。大肠埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603均购于卫生部临床检验中心。

实验试剂：DNA Marker、PCR配套试剂及溴化乙锭购自北京天根生化科技公司，琼脂糖购自美国Promega公司，扩增引物由上海生工生物工程股份有限公司合成；……