张 炯，王 佳，王 芳，李贵森

肾脏缺血再灌注损伤(renal ischemia reperfusion injury，RIRI)是临床上常见的一种临床病理生理过程，是由于肾脏缺血及重获血流灌注或氧供应后, 对所产生的损伤作用。常继发于肾移植、休克、心脏体外大循环手术等，是引发急性肾损伤乃至急性肾衰竭的常见原因[1-3]，严重影响患者预后。如何减轻RIRI，成为改善肾功能的关键。蛇床子素(Osthole)是从天然植物蛇床中提取的一种单体，研究[4-5]显示其具有抗病毒、抗氧化、抗炎、抗凋亡、增强免疫等多种生物学功能，并且毒副作用低，具有良好的临床应用前景。现就蛇床子素在肾脏缺血再灌注损伤中的作用及潜在机制进行探讨。

1 材料与方法

1.1材料30只健康雄性SD大鼠，体质量220～250 g，由四川大学实验动物中心提供。Osthole购自中国药品生物制品检定所，纯度99．9%。Cleaved-Caspase3、Caspase3、Cleaved-Caspase9、Caspase9、Bax、BCL-2、Cyt C一抗均购于美国CST公司；ATP活性试剂盒、活性氧(reactive oxygen species,ROS)试剂盒和线粒体膜电位试剂盒均购于美国Ebioscience公司；水合氯醛、聚乙二醇、细胞质和细胞核提取试剂盒均购于武汉谷歌公司。

1.2方法

1.2.1动物分组与模型制备 30只SD大鼠随机均分为假手术组(Sham组)、肾脏缺血再灌注损伤组(RIRI组)和蛇床子素组 (Osthole组)。Osthole组在术前45 min分别给予腹腔注射药物Osthole(40 mg /kg)，此剂量依据文献[6]。Sham组和RIRI组在术前45 min给予腹腔注射等体积量的生理盐水。参照Xie et al[6]建立大鼠RIRI模型。

1.2.2标本收集 肾脏恢复血流再灌注24 h后,收集各组大鼠血清和左侧肾脏, 离心，送四川省人民医院检验科利用全自动生化分析仪检测血清肌酐(creatinine, Cr)和血清尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)的水平，取部分左侧肾置于-80 ℃冰箱保存，用于Western blot蛋白检测，其剩余肾组织置于10%的多聚甲醛以便利用HE染色观察肾脏病理形态。……