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肝细胞生长因子对小鼠巨噬细胞M1、M2亚型极化的影响

2018-11-07胡泽平顾奕玥王云飞

安徽医科大学学报 2018年11期
关键词:检测

圣 波,胡泽平,郭 影,顾奕玥,王云飞,周 青,汪 渊

肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor, HGF)是间质细胞趋化的多功能生长因子,可作用于多种类型的细胞,在细胞增殖、运动与迁移、抗凋亡、抗纤维化和调节免疫等方面发挥重要的生物学功能[1]。最近研究[2]表明:HGF具有很强的抗炎作用,增加其表达可能有抗动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)作用。AS是发生在动脉血管壁的慢性炎症性疾病,炎症反应是其突出的促发因素。其中,巨噬细胞扮演着重要角色[3]。巨噬细胞根据激活方式的不同,可分为经典活化的M1型和替代活化的M2型。M1型巨噬细胞具有促炎作用,增加易损斑块的不稳定性,加速AS进程;M2型巨噬细胞具有抗炎作用,促进组织修复与血管形成,延缓AS进程。在AS中,两者之间的比例显著影响斑块的结局。本课题组前期研究[4]已表明,在AS兔模型中,HGF通过抑制M1型巨噬细胞浸润、诱导M2型巨噬细胞分化而促进斑块稳定,抑制AS进展。然而,体外条件下,HGF能否调控巨噬细胞极化至今尚未见报道。该研究探讨体外条件下,HGF对巨噬细胞M1、M2型极化的影响。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1细胞株 RAW264.7细胞株为小鼠来源的巨噬细胞株,由中国科学技术大学生命科学院馈赠。

1.1.2主要试剂和仪器 HGF、白介素-4(interleukin-4, IL-4)和干扰素-γ(interferon-γ, IFN-γ)购自美国Peprotech公司;二甲基亚砜(dimethylsulfoxide, DMSO)、细菌脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)及3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide, MTT]购自美国Sigma公司;DMEM培养基(高糖)购自美国Gibco公司;胎牛血清购自杭州四季青生物工程材料有限公司;青霉素、链霉素购自华北制药华胜公司;兔诱导性一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)多抗购自美国Abcam公司;……

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