任凌燕 朱 鸣 霍丽霞 王霄一

局灶节段肾小球硬化症（FSGS）发病机制尚不明确，现有研究主要聚焦在遗传突变[1]、循环渗透因子[2]、机械应力[3]等非免疫因素导致的足细胞损伤与丢失。Zhang等[4]研究表明，FSGS伴随着足细胞损伤及某些细胞因子的激活，但具体发病机制不清楚。Qu等[5]发现Kindlin-2通过与磷肌醇类、整合素的相互作用进一步调节足细胞黏附与纤维连接蛋白的沉积，提示Kindlin-2参与了肾小球疾病。Wei等[6]研究表明，敲低Kindlin-2可以有效减轻UUO小鼠的肾脏纤维化。本实验通过建立小鼠局灶节段肾小球硬化症-阿霉素肾病模型，探讨Kindlin-2在局灶节段肾小球硬化症模型小鼠足细胞损伤发病中的作用。

1 实验材料

1.1 动 物 8周龄健康雄性SPF级BALB/C小鼠36 只，体质量（27.5±2.5）g，所有动物均采购自南京大学模式动物研究所，动物许可证号：SYXK（苏）2015-0001，饲养于浙江中医药大学实验动物中心SPF级动物房，温度24～28℃，湿度75%左右，以标准饲料饲养，自由饮水及摄食，适应性喂养1周。

1.2 药物与试剂 阿霉素（adriamycin，ADR，北京索莱宝科技有限公司，批号H44024359，用生理盐水配制成浓度2mg/mL）；兔抗鼠肾母细胞瘤（WT-1）多克隆抗体（abcam，批号 ab89901）；FITC标记山羊抗兔IgG（北京中杉金桥生物科技有限公司，批号ZF-0311）；小鼠尿微量白蛋白ELISA检测试剂盒（南京建成生物科技有限公司，批号E038）；小鼠血清白蛋白（ALB，南京建成生物科技有限公司，批号A028-1）；小鼠血清总胆固醇ELISA检测试剂盒（TC，南京建成生物科技有限公司，批号C011-2）；总RNA提取试剂盒（TaKaRa公司，批号9108Q）；逆转录试剂盒（TaKaRa公司，批号RR047A）；PCR引物合成（上海生工生物合成有限公司）。

2 实验方法

2.1 分组与造模 36只雄性BALB/C小鼠适应环境1周，采用抽签法随机分为正常对照组和模型组，各18只。……