刘娜 王琪蕾 陈凌云

【摘 要】 目的：用高效液相色谱测定脂质体中克班宁的含量。方法：色谱柱采用Diamonsil C18 （4.6 mm×250 mm，5 μm），以甲醇-0.008%三乙胺水=75∶25为流动相，流速1.0mL/min，柱温30℃，检测波长280nm。结果：克班宁在0.06～1.8mg/mL范围内有良好的线性关系，克班宁平均回收率为101.56%，RSD为6.77%。结论：本方法操作简便，結果准确，重现性好，适用于测定脂质体中克班宁的含量，便于质量控制。

【关键词】 高效液相色谱；脂质体；克班宁

【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2018）14-0022-03

Abstract：Objective To study the determination method of Crebanine in liposome using HPLC. Methods The separation was performed on a Diamonsil C18 column（4.6mm×250mm， 5μm）， The mobile phase was composed of methanol-（0.008%）triethylamine solution （75∶25， V/V）， flow rate of 1.0mL/min， column temperature of 30℃， the detection wavelength of 280nm.Results Crebanine has a good linear relationship in 0.06～ 1.8mg/mL the linear range， the average recovery rate was 101.56%，RSD was 6.77%. Conclusion The method is simple， accurate， reproducible and suitable for the determination of the content of Crebanine in liposomes， easy quality control.

Keywords：HPLC； Liposome； Crebanine

克班宁（Crebanine，Cre）是由防己科千金藤属植物“山乌龟”中提取得到的异喹啉类阿朴菲型生物碱。前期研究发现[1-2]其具有较强的心血管药理活性，对多种实验性心律失常具有较强的对抗作用，且起效迅速，维持时间较短，是值得深入研究开发的生物活性物质。由于前期研究[3-5]已发现克班宁具显著活性的同时也有较明显的毒性，故研究将克班宁制成脂质体，使其毒性降低，安全有效地发挥其抗心律失常作用。本实验采用HPLC方法测定脂质体中克班宁的含量，操作简便，结果准确，重现性好，为克班宁脂质体的质量标准提供依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器 Agilent 1100高效液相色谱仪（自动进样器、二级管阵列检测器、恒温柱温箱）， C18色谱柱（Diamonsil C18， 4.6mm×250mm，5μm）； 电子天平（Sartorius BT 25s），SK 250 HP 超声清洗仪（上海科导超声仪器有限公司）。

1.2 材料 克班宁对照品（自制[6]）；大豆磷脂（批号：20140202，上海太伟药业有限公司）；胆固醇（批号：20110708，中国新兴化工试剂研究所）；克班宁脂质体属于自制；甲醇、三乙胺等流动相所用试剂均为色谱纯，其余均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 克班宁脂……