霍桂桃 杨艳伟 吴曦 刘甦苏 李芊芊 周舒雅 柳全明 王三龙 沈月雷 吕建军 范昌发

（1. 中国食品药品检定研究院国家药物安全评价监测中心 药物非临床安全评价研究北京市重点实验室，北京 100176；2. 中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所模式动物研究室，北京 100050；3. 百奥赛图基因生物技术有限公司，北京 101111）

p53基因作为最为人熟知的抑癌基因，其在肿瘤发生方面的功能已被深入研究［1］。p53基因的突变不仅发生于大量人类肿瘤病例中［2］，其功能在动物模型中也不断被研究验证。截至目前，由于技术及成本所限，敲除/点突变/转基因小鼠仍为最广泛的使用模型［3］。然而，遗传修饰的小鼠模型在某些方面并不能较好地模拟人类缺失p53基因的表型。例如，在小鼠中敲除p53基因导致小鼠4-6个月时即有肿瘤发生，肿瘤类型主要为胸腺淋巴瘤［4，5］。而同样先天性缺失p53基因的李-佛美尼综合症患者的肿瘤谱更为多样，且恶性肉瘤发生率较高［6］。

相较于小鼠，大鼠在模拟人类疾病方面具有更大的优势［7］。虽然在很长一段时间内缺乏用于改造大鼠基因的遗传学工具，但随着近10年分子生物学技术的飞速发展，锌指酶、ENU突变技术及基于胚胎干细胞（Embryonic stem cells，ESC）的同源重组技术被先后用于制作基因敲除大鼠模型［8，9］。虽然p53基因敲除大鼠可通过ES细胞打靶得到，但在国内仍较难获得。本文基于类转录激活因子效应物核酸酶（Transcription activator-like effector nuclease，TALEN）技术制作了p53基因敲除大鼠。TALEN由一个包含核定位信号的N端结构域、一……