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BMP7蛋白对大鼠急性脊髓损伤后神经元修复作用的研究*

2018-08-31张玉玲白广超金宏亮张文李宽新

生物骨科材料与临床研究 2018年4期

张玉玲 白广超 金宏亮 张文 李宽新*

脊髓损伤是一种高致残率的中枢神经系统疾病,其常由车祸伤、高处坠落伤等引起[1]。原发性机械损伤及继发性神经功能障碍可导致局部神经元死亡、炎性因子浸润、轴突脱髓鞘等一系列变化,使得脊髓损伤的治疗成为脊柱外科领域的难点[2]。由于神经元的不可再生性,脊髓损伤后神经元的修复及补充就成了脊髓损伤治疗的关键[3]。目前研究表明,属于转化生长因子-(TGF-)超家族的骨形态发生蛋白 7(bone morphogenetic protein 7, BMP7)具有神经保护功能[4],本研究使用BMP7蛋白治疗大鼠脊髓损伤模型,检测神经修复标志蛋白表达情况,探索BMP7蛋白脊髓损伤后神经细胞的修复作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物

清洁级 Wistar大鼠70只,雄性,4周龄,体质量约110 g,由石河子大学医学院实验动物中心提供。所有实验操作均符合实验动物伦理学要求。

1.2 主要试剂

BMP7蛋白(美国R&D公司)、10%水合氯醛(上海联硕生物科技有限公司)、0.9%氯化钠注射液(新疆华世丹药业有限公司)、苏木素染液、伊红染液及中性树胶(上海榕柏生物技术有限公司)、大鼠神经丝蛋白200(neurofilament protein 200,NF200)单克隆抗体、大鼠胶质纤微酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)单克隆抗体及大鼠突触素(Synaptophysin,SYP)单克隆抗体(abnova公司,美国)、羊抗大鼠 IgG-HRP(上海君瑞生物技术有限公司)、DAB显色试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)。

1.3 主要仪器

Allences's打击器(石河子大学医学院第一附属医院骨科中心提供)、0.1mm 聚乙烯导管(自制)、动物手术器械(深圳瑞沃德公司)、石蜡包埋机 SPCC-6D及切片机SPCC-335(东莞市谱标实验器材科技有限公司)、烘箱OGS60(美国ThermoFisher)、光学显微镜E100(日本Nikon)、生物安全柜(苏州安泰公司)、纯水器(成都超纯公司)。……

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