司晓光，张晓青，郝建安，杜瑾，张爱君，曹军瑞

国家海洋局 天津海水淡化与综合利用研究所，天津 300192

作为一种全球性海洋灾害，赤潮已经引起世界各国的高度关注。科研人员进行了诸多研究和探索，以应对频繁发生的赤潮灾害，以期能有效地防治赤潮，减少其引发的危害和损失[1-3]。

微生物具有种类多、繁殖迅速、功能丰富等特点，因此在治理赤潮中具有极大的优势。近年来，科研人员对赤潮的微生物防治方法进行了大量研究，取得了一些很好的成果，其中利用微生物自身分泌的具有溶藻作用的胞外物质进行溶藻是目前研究的热点[4-6]。迄今，已报道的溶藻活性物质主要包括蛋白质类、氨基酸类、多肽类、表面活性剂、抗生素等[7-10]。

微生物产生的溶藻活性物质对环境条件的要求较高，对其实际应用有一定的影响[11-14]。为此，我们研究了本实验室获得的芽孢杆菌产溶藻活性物质的环境稳定性，探讨其对温度、酸碱度、反复冻融的耐受性以及贮存时的活性衰减周期，获得了最佳使用、运输和贮存条件，为该活性物质在赤潮治理中的实际应用奠定了基础。

1 材料与方法

1.1 材料

芽孢杆菌（Bacillus）dhs-330-021为本实验室保存菌种，由dhs-330转座突变库筛选获得；链状亚历山大藻（Alexandrium catenella）购自上海光语生物科技有限公司，为典型赤潮藻。

dhs-330-021发酵培养基：葡萄糖32 g（单独灭菌），尿素5.0 g，酵母提取物1.2 g，Na2HPO4·12H2O 3.0 g，KH2PO40.8 g，MgSO4·7H2O 0.15 g，微量元素溶液（CaCl27.5 g/L，FeSO4·7H2O 2.0 g/L，MnSO4·H2O 2.0 g/L）1.0 mL，定容至1 L并调整pH至7.0，115℃灭菌30 min。

链状亚历山大藻培养基（f/2培养基）：NaNO3（75.0 g/L）1 mL，NaH2PO4·H2O（5.0 g/L）1 mL，NaSiO3·9H2O（30.0 g/L）1 mL，微量元素溶液［FeCl3·6H2O 3.15 g，Na2EDTA·2H2O 4.36 g，CuSO4·5H2O（9.8 g/L）1 mL，NaMoO4·2H2O（6.3 g/L）1 mL，ZnSO4·7H2O（22.0 g/L）1 mL，CoCl2·6H2O（10.0 g/L）1 mL，MnCl2·4H2O（180.0 g/L）1 mL，用水定容至1 L］1 mL，维生素溶液［维生素B1200 mg，维生素H（1.0 g/L）1 mL，维生素B12（1.0 g/L）1 mL，用水定容至1 L］0.5 mL，用过滤海水定容至1 L。……