闵 丽，万伯顺，童贻捷，陈 龑，张少军，王秋平，高洪娣，张 辉，熊国华，应光耀

瘘管是连接空腔脏器与体表或空腔脏器之间的病理性管道，通常有2个以上开口。瘘管属于中医“漏”的范畴。漏的中医辨证分型分为湿热下注型、阴液亏虚型以及正虚邪恋型[1]。在临床上，以正虚邪恋型最为难治。这部分瘘管手术后易形成慢性难愈性创面，愈后易复发，严重影响患者的生活和工作质量。建立正虚邪恋型瘘管动物模型，是对此类瘘管进行临床疗效以及药效评价的前提。本实验采用环磷酰胺腹腔注射、皮下埋置带菌弹簧纱条的方法建立大鼠模型，通过检测大鼠免疫细胞，证实该实验方法可建立稳定性好、重复性高的正虚邪恋型体表瘘管模型。

1 材料与方法

1.1 实验动物 SPF级SD大鼠16只，雄性，体质量（280±20）g。上海公共卫生临床中心实验动物中心提供，饲养于生物安全二级实验室标准的IVC系统大鼠独立通气笼中。笼内相对湿度40%～60%，温度 18～25 ℃。121 ℃、30 min高压灭菌专用垫料、饲料及饮水。

1.2 菌株与菌液 临床分离的金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌，由上海公共卫生中心生物安全二级实验室鉴定并提供。采用细菌基础培养基培养细菌至对数期，将细菌与30%甘油生理盐水混合，–80℃冻存。使用时将冻存的菌液复苏，将对数期生长的菌液稀释成9×108cfu/mL浓度，将金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌混合，4 ℃保存。

1.3 自制弹簧纱条 选用3 cm长，外径为0.4 cm的不锈钢弹簧，0.5 cm×12 cm的医用纱条，将纱条对折成3 cm长穿入弹簧内，高温消毒。

1.4 试剂与仪器 RPMI-1640培养液、Hepes、胎牛血清购自美国Gibco公司；……