彭霈，曹秉振

(济南军区总医院，济南250031)

热射病是一种致死性急症，临床上以较高的核心温度、皮肤干燥伴严重的中枢神经系统损害(如谵妄、抽搐、昏迷)为主要临床表现[1]。尽管热射病发生时，中枢神经系统的损伤由病理及影像学变化可直接观测到[2];但在全身炎性反应综合征发生时，中枢神经系统中炎性因子发生变化的机制仍未明了。已有多个学者发现，热射病发生时巨噬细胞分泌的细胞因子水平发生了变化[3，4]，巨噬细胞的极化方向与炎性因子密切相关。巨噬细胞的极化[5]分为M1型和M2型，M1型为促炎性因子型，常见的M1型表面标志物有HLA-DR、CD197、诱导型一氧化碳合酶(iNOS)等[6]；M2型为抗炎性因子型，M2型表面标志物有CD206、CD301、Ⅰ型精氨酸酶(ArgⅠ)等[7]。2016年3～6月，本实验选取iNOS、ArgⅠ分别作为两种极化方向的指标检测，探讨热射病模型大鼠巨噬细胞的极化方向。

1 材料与方法

1.1 动物、试剂及仪器 清洁级Wistar大鼠40只(36只+储备4只)，体质量200～250 g，8周左右，购自山东大学齐鲁医学院动物中心。适应性生长2周后开始用于实验。可控式恒温箱购自山东瑞科电器公司；Aanti-CD68 antibody购自美国abcam公司；BX41显微镜、倒置相差显微镜购自日本奥林巴斯光学工业株式；RPMI-1640不完全培养基购自美国Gibco公司；细胞核、浆蛋白抽取试剂盒，BCA蛋白质定量试剂盒购自上海康成生物公司；iNOS(稀释比1∶2 000)、ArgⅠ(稀释比1∶2 000)购自美国abcam公司；Horseradish Peroxidase(HRP)结合的二级抗体、HRP-结合的抗生物素抗体购自上海康成生物；Western显影液、定影液购自上海冠龙照相器材公司；Western扫描仪购自上海天能科技有限公司。

1.2 动物分组及处理 将实验动物共分为热暴露即刻组，热暴露后1 d、2 d、3 d、7 d组，对照组共6组，每组6只。……