KLF16对胃癌细胞增殖、克隆能力的影响及机制
2018-08-20顾清张莉张新星代小松陈和平
顾清,张莉,张新星,代小松,陈和平
(四川省医学科学院·四川省人民医院,成都610072)
胃癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,每年死亡病例数约68万,其中约50万在中国[1]。多数胃癌患者就诊时已处于中晚期,以手术切除为基础并辅助放化疗的综合治疗方案是目前主要的临床治疗策略,然而放化疗耐药、对其他组织器官的侵袭等严重制约了胃癌患者的治疗效果,胃癌患者的预后不佳,临床亟需寻找新的与胃癌治疗相关的生物靶分子[2]。Krüppel样转录因子(KLF)可与富含GC序列的启动子区结合,调节基因表达。KLF在各种生理和病理过程中发挥重要作用,如血管形成[3]、肿瘤形成[4,5]等。研究证实,KLF2可通过上调p15和p21基因表达,抑制肿瘤增殖[6]。KLF16是Kaczynski等[7]在2002年鉴定的一个新的KLF家族成员,可抑制胰腺癌细胞增殖,而关于KLF16在胃癌中的表达文献报道甚少。2016年1月~2017年10月,我们检测了KLF16在人胃癌细胞中的表达,并探讨了其对胃癌细胞增殖、克隆能力的影响及机制。
1 材料与方法
1.1 材料 人胃上皮细胞株GES-1、人胃癌细胞株BGC-823、SGC7901、HCG-27和AGS(中国科学院上海细胞库),RPMI 1640培养基、胎牛血清(FBS)和双抗(美国Gibco公司),免疫组化试剂盒(上海经科化学科技有限公司),兔抗人KLF16多克隆抗体(ab187973,IHC-P,美国Abcam公司),RNA提取试剂盒和逆转录试剂盒(大连宝生物工程有限公司),Real-time PCR引物序列(上海生工生物工程技术服务有限公司),脂质体Lipofectamine 3000(美国Invitrogen公司),shRNA(上海吉玛制药技术有限公司),CCK-8溶液(上海翊圣生物科技有限公司),低熔点琼脂糖(北京凯瑞基生物科技有限公司),RIPA蛋白裂解液……
