刘 婷，张承英，苏静克，韩 宁，朱 彪

动脉硬化是一类以血管管壁增厚变硬、弹性减弱和管腔缩小为特征的疾病，它严重威胁着人类的健康。该病变从血管内膜起始，内皮细胞是抵御病变发生的第一道防线，而内皮依赖性血管舒张功能紊乱则是本病发生的一个早期标志[1, 2]。临床发现，年龄是该病发生、发展的一个独立危险因素，近90%的动脉硬化和冠状动脉硬化性心脏病发生在55岁以上的老年人[3]。 GDF 11是一种能抵抗衰老的细胞因子，属于转化生长因子β(transforming growth factor-β，TGF-β)超家族成员[4]。最近有研究表明，通过腹腔注射重组GDF 11，能够促进老龄小鼠脑血管内皮细胞增殖，进而增加脑血管容积、增大血流量，从而使脑血管“返老还童”[5]。动脉硬化亦属于衰老相关性疾病，本研究探讨GDF 11对老龄小鼠内皮依赖性血管舒张功能的影响，以期为临床上治疗动脉硬化提供新靶点。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂 选择18个月龄雄性SPF级C57BL/6J小鼠20只，购自军事医学科学院实验动物中心。重组人GDF 11(Pepro Tech，美国)；去甲肾上腺素(norepinephrine，NE)、乙酰胆碱(acetylcholine，Ach)、硝普钠(sodium nitroprusside，SNP)[Sigma，美国]；脂联素(adiponectin)ELISA试剂盒(R&D，美国)；Krebs液自行配制(2.0 L三蒸水中加入氯化钠13.5 g，氯化钾685.4 mg，磷酸镁278.4 mg，磷酸二氢钠278.4 mg，碳酸氢钠3.7 g，氯化钙555.0 mg和葡萄糖4.0 g)；一抗[兔抗人单克隆Smad2/3，磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)抗体]、二抗[山羊抗兔单克隆抗体(辣根过氧化物酶标记)](CST，美国)；BCA测定试剂盒(南京建成，中国)；PVDF膜(Millipore，美国)。

BL-420S型生物信号采集系统、JH-2型张力换能器与HV-4恒温灌流系统(成都泰盟，中国)；7600-020型全自动生化分析仪(日本日立公司)；340型酶标仪(BDSL，英国)；DYY-7C型电泳仪、DYCZ-40型转膜仪(北京六一，中国)。……