人脑胶质瘤培养组织对化疗药物的敏感性
2018-08-03徐立新师忠芳董丽萍
徐立新,张 伟,师忠芳,董丽萍,闫 旭,袁 芳
脑胶质瘤是最常见的中枢神经系统恶性肿瘤,临床采用手术、放疗和化疗的综合治疗,有效化疗是延长术后脑胶质瘤患者生命的必要手段之一[1]。但由于血脑屏障和肿瘤耐药现象的存在,化疗药物的疗效仍然不尽如人意[2],术后脑胶质瘤患者选择适合的化疗药物对提高疗效、减轻不良反应有重要意义。本研究用体外药敏检测法比较了脑胶质瘤标本对临床5种常用化疗药的敏感性,并分析了其与患者病理分级的相关性;电镜观察了胶质瘤敏感药物标本的超微结构,对作用机制进行初步探讨,为术后胶质瘤患者选择合适的化疗方案提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料 112例标本选自2013-01至2015-12北京天坛医院脑胶质瘤患者手术切除的脑胶质瘤组织。男74例,女38例;年龄12~71岁,平均(42.95±11.79)岁;初发97例,复发15例。按照WHO脑胶质瘤分类标准:Ⅱ级53例,Ⅲ级20例,Ⅳ级39例。
1.2 试剂 组织块培养液为含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液。化疗药物尼莫司汀(ACNU)、顺铂(DDP)、替莫唑胺(TMZ)、长春新碱(VCR)、替尼泊甙(VM26)五种单独用药及DDP+VM26组合用药,所试验药物浓度均为血浆峰浓度,分别为0.7、0.25、0.5、2.0、0.05 mg/ml。
1.3 组织培养药敏检测法 根据文献[2]的方法进行实验。手术当日取无污染组织标本,切割成1 mm3大小的组织块,放置于有滤纸的24孔培养板中,加入组织块培养液300 μl,37 ℃ 、5%CO2培养箱中孵育。第2天用江苏先声药业有限公司开发的TECIA(tissue culture-end point staining- computer image analysis, TECIA)图像分析系统测定组织块面积(area, A),然后除对照孔外,每孔加入化疗药物3 μl,112例标本除观察5种化疗药外,其中88例增……
