微粒体谷胱甘肽S转移酶1过度表达促进肝癌发生发展
2018-07-16黄富强杨华瑜毛一雷张宏冰
蔡 培,黄富强,赵 齐,周 贤,杨华瑜,毛一雷,张宏冰*
(1.中国医学科学院基础医学研究所 北京协和医学院基础学院 生理学系, 北京 100005;2.中国医学科学院 北京协和医学院 北京协和医院 肝脏外科, 北京 100730)
中国肝癌发生率和病死率占世界肝癌总发病和总死亡的50%[1],肝癌发病率居中国所有癌第4位,致死率居第2位[2]。目前手术切除仍是治疗肝癌的首选,有效治疗肝癌的药物依旧匮乏。因此,研究肝癌发生的分子及病理改变有利于深入了解该疾病,找到有效的治疗靶点。研究表明,微粒体谷胱甘肽S转移酶1(microsomal glutathione S-transferase 1, MGST1)在人肺腺癌和鱗状细胞癌、骨癌、急性髓性白血病和胶质母细胞瘤等[3-6]多种癌中表达上调,然而其与肝癌的关系尚不清楚。本研究发现,人肝癌组织中MGST1蛋白表达高于癌旁组织,在不同的肝癌细胞系中敲低和过表达MGST1后,探讨其对肝癌细胞增殖、迁移和肝癌发生发展的影响。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1实验动物和组织标本:SPF级4~6周(质量为10~14 g)BALB/c-nu雌性小鼠(北京维通利华实验动物技术有限公司)(合格证号为:11400700262195);原发性肝癌病例标本(由北京协和医院肝胆科提供),所有肝癌患者已签署知情同意书,本研究已获得北京协和医学院基础学院伦理委员会的批准书。
1.1.2细胞系:人肝癌细胞系MHCC97H和HCCLM3(复旦大学肝癌研究所);HepG2、SK-Hep-1、Hep3B2.1-7和HEK293T(ATCC);HepG2.2.15、Bel7402(北京大学人民医院肝病研究所);慢病毒载体PLL3.7及其包装质粒(厦门大学尤涵教授惠赠);慢病毒载体pCDH及其包装质粒(Addgene公司)。
1.1.3主要试剂:胰蛋白酶、胎牛血清和DMEM培养基(Hyclone公司);Trizol试剂(Sigma Aldrich公司);……
