李 宁，张克勤，彭侃夫

(1.重庆大学附属中心医院/重庆市急救医疗中心/重庆市第四人民医院内分泌肾内科 400014； 2.陆军军医大学第一附属医院肾科，重庆 400038)

尿毒症是慢性肾衰竭(chronic kidney disease，CKD)等多种肾脏疾病转归的最终形式。对尿毒症患者机体产生严重致病作用的主要是潴留堆积的各种无机或有机分子，被称为尿毒症毒素。按来源来分，主要包括本来就需排泄的有毒物质和机体正常所需由于排除障碍导致含量剧增的物质，前者的代表性分子有尿素、肌酐，而甲状旁腺激素(parathyroid hormone，PTH)是后者的典型代表[1]。笔者在前期研究中发现，PTH可以诱导人血管内皮细胞发生内皮细胞-间质转化(endothelial-mesenchymal transition，EndMT)[2]，既可以观察到细胞形态发生纤维化转变，又可以检测到EndMT一系列标志分子的表达改变，包括血管内皮细胞标志分子血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)和CD31的表达降低，纤维细胞标志分子α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达升高，提示尿毒症患者血清中较高水平的PTH可能通过诱导血管内皮细胞发生EndMT来产生对心血管的损伤，但是其中的分子机制尚不清楚。近年来的研究发现，整合素连接激酶(integrin-linked kinase，ILK)作为转化生长因子β(TGF-β)信号下游效应蛋白，其激活与EndMT密切相关[3-5]。因此，本研究进一步利用TGF-β及ILK的抑制剂，探讨TGF-β/ILK通路在PTH诱导EndMT中的作用。

1 材料与方法

1.1材料 人主动脉血管内皮细胞(HAECs)及内皮细胞培养基购自美国Lifeline Cell Technology公司。PTH购自美国Anaspec公司(货号：27080)，按照说明书溶解于无菌水中。TGF-β抑制剂SB431542、Pirfenidone(PFD)购自美国Selleck公司，ILK抑制剂Cpd22购自美国Millipore公司，均按照说明书溶解于二甲基亚砜(DMSO)中。……