徐 军，汪家春*，李兆兰，王 玥，陈雅琳

（1.上海健康医学院医疗器械学院，上海 200093；2.中国人民解放军海军医学研究所，上海 200433；3.南京大学 生命科学学院，江苏 南京 210093；4.新疆大学 生命科学与技术学院，新疆 乌鲁木齐 830000）

游离氨基酸又称非蛋白质氨基酸，呈游离状态，其种数远远超过蛋白质氨基酸。游离氨基酸是许多中药材的重要有效成分，广泛分布于植物、动物、微生物体内。游离氨基酸具有重要的生物功效和药用价值，作为临床医疗和药用也超过蛋白质氨基酸[1-2]。目前，真菌菌丝体的氨基酸分析主要着重于食用菌蛋白质氨基酸的分析，缺少对菌丝体的游离氨基酸组成的系统研究。有学者对虫生真菌的蛋白氨基酸进行了分析，但是少见对虫生真菌游离氨基酸的分析。因此虫生真菌中各种游离氨基酸的种类和含量的分布状况，将可作为评价该虫生真菌菌丝的保健和药用功效的重要指标，为虫生真菌资源利用和应用价值的评价提供技术和理论参考数据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

1.1.1 供试菌种

3种虫生真菌的菌种：从冬虫夏草的菌核和子座的菌丝组织经组织分离和克隆而获得的纯菌种，将试管母种通过扩培，人工发酵培养而获得大量菌丝体。菌丝经过冷冻干燥、粉碎制成发酵菌粉，4℃保存备用。

1.1.2 试剂

氨基酸标准品（24种），邻苯二甲醛（o-phthalaldehyde，OPA）、氯甲酸芴甲酯（9-fluorenylmethyl chloroformate，FMOC）（均为分析纯）：美国Sigma公司；甲醇、乙腈（均为色谱纯）：中国药品生物制品鉴定所；水为超纯水。

1.2 仪器与设备

Agilent1200型高效液相色谱仪（high performance liquid chromatography，HPLC）：美国安捷伦科技公司；……