刘 洋，李艳菊，王 宁，刘振华，杨 华，刘燕青，王飞清△

(1.贵阳中医学院第一附属医院检验科，贵阳 550001；2.贵州医科大学附属医院血液科，贵阳 550004；3.贵州省骨科医院药剂科，贵阳 550002；4.贵州省人民医院肝胆外科，贵阳 550002)

研究显示，过量氟可导致机体氧化应激产物大量蓄积进一步损伤子宫、卵巢等生殖脏器[1-2]。当前，氟中毒对雌性机体损伤和防治是科研人员的难题，本课题组前期研究发现燃煤型氟中毒可影响雌鼠动情周期、性激素分泌、损伤卵巢超微结构[3-5]。实验报道，p53和p21在失重致雌鼠卵巢衰老中呈现高表达[6]。氟中毒是否通过激活衰老基因p53和p21的表达，促进卵巢过早衰老，影响雌性生殖功能的相关机制研究还未得到科研人员的关注。本课题组设计以SD雌鼠为研究对象，解析燃煤型氟中毒致雌鼠卵巢早衰影响因子，并为今后病区雌性生殖功能的防治工作起到重要意义，现报道如下。

1 材料与方法

1.1材料 由贵州医科大学动物实验中心提供90～100 g清洁级SD大鼠24只，许可证号：SCXK(黔)2012-0001。实时定量荧光PCR(RT-PCR)由大连宝生物公司提供；引物序列primer3设计由上海英俊公司合成；PF-1型氟离子选择性电极由上海精密科学仪器有限公司生产；Olympus BX51双目光学显微镜由奥林巴斯光学工业株式会社生产。

1.2方法

1.2.1动物模型构建 适应性喂养1周，分为对照组、低氟组(25 mg/kg)、中氟组(50 mg/kg)、高氟组(100 mg/kg)，每组6只，每周调整鼠笼的位置，力求各组雌鼠的实验条件一致。各组自由饮水，自由食用不同配方的原煤加拌泥煤烘烤的玉米饲料，于染氟90 d处死。……