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人参皂苷Rg1通过抑制Wnt/β-catenin通路促进退变人腰椎间盘髓核细胞的生长及胞外基质合成

2018-05-07甄欢欢刘汝银岳宗进

中国病理生理杂志 2018年4期
关键词:检测

鲁 花, 于 露, 甄欢欢, 刘汝银, 岳宗进

(河南中医药大学第二附属医院脊柱科, 河南 郑州 450002)

腰椎间盘突出是以椎间盘退变为主要特征的一种常见病、多发病,也是腰腿痛的重要起因之一[1]。由于腰椎间盘的组织再生能力有限,退变后较难逆转[2]。人腰椎间盘髓核细胞(human lumbar nucleus pulposus cells,HNPCs)是人体腰椎间盘髓核组织的唯一构成细胞,严重影响着腰椎间盘退变的发生和发展[3]。腰椎间盘退变可直接导致髓核细胞数量减少和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的合成减少[4]。人参皂苷Rg1(ginsenoside Rg1)作为传统中药人参的有效成分,具有促进海马神经发生、提高神经可塑性、抗衰老、提高免疫和辅助抗肿瘤等作用[5]。在体外,可通过细胞氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)来模拟体内髓核细胞退变的微环境[6-7]。有报道证实,人参皂苷Rg1能通过抑制细胞凋亡保护脑部缺血再灌注损伤[8],提示其对病理损伤下的细胞具有一定的保护作用。但是,人参皂苷Rg1在HNPCs退变中是否也具有积极的保护作用尚不明确。因此,本文拟探究人参皂苷Rg1对退变HNPCs生长和ECM合成的影响,并进一步研究其可能的作用机制,以期为腰椎间盘突出患者的临床治疗在寻找新的药物靶点方面提供初步的实验依据。

材 料 和 方 法

1 试剂和材料

HNPCs购于ScienCell;DMEM培养基、胎牛血清和胰蛋白酶等均购于HyClone;人参皂苷Rg1购于中国食品药品鉴定研究院;LiCI购于Sigma;CCK-8试剂盒购于上海生工生物工程有限公司;Real-time PCR 试剂盒购于Invitrogen;引物合成由上海生工生物工程股份有限公司合成;Annexin V-FITC检测试剂盒购于Trevigen;Caspase-3活性试剂盒和Western blot所用抗体均购于Abcam;……

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