贺晓静， 贺 洁

(1开封大学医学部， 2河南大学生命科学院， 河南 开封 475000)

肝癌是世界上最流行的恶性肿瘤之一，全球每年新发病例达200万例。5年生存率低至5%[1]。鉴于肝癌患者手术和化疗后的预后不良，为了改善治疗，因此，需要探索更多的治疗方法。近些年，肿瘤免疫治疗已经成为一个很有发展前景的治疗方法。这种方法具有消除全身肿瘤细胞的潜力，并具有区分肿瘤和非肿瘤细胞的特异性。在恶性肿瘤组织中过表达的基因或抗原是特异性肿瘤免疫治疗的先决条件[2]。MAGEC2 (GenBank： AF151378)几乎不出现在正常组织中，仅在睾丸中检测到MAGEC2 的mRNA表达；但是在肝癌、恶性黑色素瘤和膀胱癌中具有高水平的MAGEC2表达。它又被称为肝细胞癌相关抗原587(hepatocellular carcinoma-associated antigen 587，HCA587)。HCA587是从肝癌患者的肝癌组织DNA表达文库中克隆出来、且在多种肿瘤组织中高表达的一种新型肿瘤/睾丸(cancer/testis，CT)抗原[3-4]。有研究发现，肝癌样品中有特别高的MAGEC2表达，mRNA水平为70%，蛋白水平为38%[5]。肿瘤抗原多肽诱导的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T-lymphocyte，CTL)除了具有特异性外，在设计上还可以对野生型多肽进行改造，从而提高主要组织相容性(抗原)复合物(major histocompatibility complex，MHC)分子的结合力，以及T细胞识别的兼并性等。本研究使用NetCTL 1.2、SYFPEITHI和IEDB等生物信息学软件进行综合预测，筛选出综合打分较高的表位，并对优势表位进行适当替换，通过鉴定筛选出新的MAGEC2 HLA-A2限制性CTL表位[6-7]。多肽疫苗的设计核心是T细胞表位，其鉴定和改造是多肽疫苗发展及应用的基础[8-10]。

材 料 和 方 法

1 材料

T2细胞和HepG2细胞(MAGEC2+、HLA-A2+)[6]由开封大学医学部实验室常规保存，在37 ℃、5% CO2饱和湿度培养条件下常规培养。……