陈丽璇， 张 红， 王小华， 段锋祺， 周 兆， 刘革修△

(1广州中医药大学， 广东 广州 510405； 2浙江省台州医院康复科， 3临海市第一人民医院普内科， 浙江 临海 317000； 4南方医科大学， 广东 广州 510515； 5暨南大学基础医学院血液研究所， 广东 广州 510632)

克拉屈滨(cladribine； 2-氯-2’-脱氧腺苷，2-chloro-2’-deoxyadenosine，2-CdA)是临床上重要的抗肿瘤药物，主要用于治疗多发性硬化症、多发性骨髓瘤、B细胞淋巴瘤和急性粒细胞性白血病等[1]。目前，由于克拉屈滨上市时间短，关于克拉屈滨的临床应用报道较少，药物疗效也有争议。克拉屈滨的抗肿瘤作用与脱氧胞苷激酶和脱氧核苷酸激酶活性有关，其主要以被动转运的方式运输到细胞内，被脱氧胞苷激酶磷酸化，转化为克拉屈滨三磷酸，掺合到DNA分子中，阻碍DNA的修复，影响DNA的合成[2]。在本研究中，我们观察克拉屈滨对内皮细胞EA.hy926的作用，探究克拉屈滨在血管生成和调控肿瘤微环境的作用基础上发挥的抗肿瘤效应，进一步讨论其治疗其它实体瘤的可能性，为临床应用提供实验依据。

材 料 和 方 法

1 材料与试剂

克拉屈滨为广州军区广州总医院血液科惠赠；DMEM/high glucose培养基购于Gibco；胎牛血清、0.25%胰酶、青霉素和链霉素购于Sigma-Aldrich；CCK-8试剂盒购于日本同仁公司；细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-FITC/PI 双染)和细胞周期试剂盒(PI单染)购于Sigma-Aldrich；兔抗人caspase-3、Bax、p21和p53抗体购于CST；RIPA细胞裂解液购自上海碧云天生物技术有限公司；ECL化学发光试剂盒购于Thermo；TNF-α、TGF-β1和VEGF酶联免疫吸附试剂盒购于武汉华美；NO检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所。96孔细胞培养板、6孔细胞培养板和25 cm2细胞培养瓶购于Beaver。……