长链非编码RNA MIAT在非小细胞肺癌中的表达及功能研究*
2018-05-07霍小蕾田向阳张毅强贾建桃韩玲娜
裴 振, 霍小蕾, 田向阳, 张毅强, 贾建桃, 韩玲娜△
(长治医学院 1生理学教研室, 2组织胚胎学教研室, 3附属和平医院, 4生化教研室, 5病理生理学教研室, 山西 长治 046000)
非小细胞肺癌(non-small-cell lung carcinoma,NSCLC)是全球范围内最常见的肺部恶性肿瘤,具有极高的发病率和死亡率,居所有的恶性肿瘤之首[1]。近来年,我国的NSCLC发病率和死亡率均呈上升趋势,其治疗也面临着严峻的挑战[2]。目前,NSCLC的治疗手段仍然是以手术治疗为主。随着治疗技术日臻成熟,尽管治疗方法大大改进,但是NSCLC的预后仍然不佳,患者5年生存率约为15%[3-4]。因此,NSCLC的治疗亟需一种新的治疗靶标,以更好监测其复发和转移等病程。长链非编码RNAs(long non-coding RNAs,lncRNAs)是一类近年来被发现与多种疾病密切相关的RNA分子[5-6],心肌梗死相关转录本(myocardial infarction-associated transcript,MIAT)是lncRNA家族分子的一员[7],在调控神经内分泌前列腺癌[8]、胃癌[9]、肾透明细胞癌[10]、慢性淋巴细胞白血病和胶质母细胞瘤[11]等恶性肿瘤的发生发展中发挥了重要作用,然而MIAT在NSCLC中的研究还鲜有报道。本研究通过研究MIAT在NSCLC中的表达、定位及分子调控方式,初步探究MIAT对非小细胞肺癌生物学行为的作用机制,为非小细胞肺癌的分子治疗提供理论依据。
材 料 和 方 法
1 材料
Lipofectamine 2000 购于Invitrogen;TRIzol试剂和逆转录试剂盒(miScriptⅡRT Kit)购于QIAGEN;逆转录试剂盒(Reverse Transcription System)购于Promega;小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)片段购于广州瑞博生物有限公司;细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)、CCK-8试剂购于碧云天生物科技公司;细胞浆/核RNA抽提试剂盒(PARISTMKit Protein and RNA Isolation System)购于Ambion;抗细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(cyclin-dependent kinase inhibitor 1A,CDKN1A)和GAPDH抗体购自上海优宁维生物科技有限公司。……
