转基因大豆及其制品二重荧光定量PCR的建立与验证
2018-05-01王凤军叶素丹陈冠武包永华
王凤军,叶素丹,*,陈冠武,包永华
(1.浙江经贸职业技术学院,浙江杭州 310018;2.汕头出入境检验检疫局,广东汕头 515000)
《2016年全球生物技术/转基因作物商业化发展态势》报告显示转基因大豆的种植面积最大,为9140万公顷,占全球转基因作物总种植面积的一半。转入大豆中的基因种类较多,大致可分为:改善品质、抗虫、抗旱、除草、抗病、高产等几个方向[1]。截止2011年,全球共有19个转基因大豆获得批准商业化种植,包括1个抗虫、3个高油、11个耐除草剂、1个抗虫耐除草剂、3个耐除草剂高油转基因大豆。我国是大豆和大豆制品进口国,国内需求不断增加。目前为止,被批准进入中国的转基因大豆品系只有10种(A2704-12、A5547-127、CV127、DP305423、DP305423×GTS40-3-2、DP356043、GTS40-3-2、MON87701、MON87701×MON89788、MON89788)[1]。
转基因生物可以获得高产和优质的产品,这可解决人类粮食短缺,饥饿,贫穷等生存问题,但同时关于转基因作物的安全担忧也层出不穷[2-5],转基因产品的安全性和合理性争议一直伴随着转基因技术的发展历程,因此对作物转基因成分进行检测也显得尤为重要。目前转基因作物检测主要以PCR方法为主,根据转基因作物转化时惯用的启动子如花椰菜花叶病毒启动子(P-35S)、胭脂碱合成酶终止子(T-NOS)以及外源启动子或终止子与作物基因组的交联结构基因等设计合成特异性引物,用体外扩增的方法定性检测转基因作物样品[6]。该方法操作简便,耗时短,可以建立针对某种作物的标准化检测体系,主要有常规定性PCR法、巢式PCR法,等温扩增法和实时荧光定量PCR法等[7-10]。如朱琳峰等[11]使用LAMP检测方法对抗草甘膦转基因大豆Cp4-epsps基因进行检测;付海滨和钱云开等[12-13]使用实时荧光PCR对转基因大豆的品系进行鉴定。……
