胡芳琴

水痘是由水痘-带状疱疹病毒（varicella-zoster virus，VZV）感染造成的一种出疹性传染病，多发病于冬季和春季，易感人群为儿童和青少年，但成人仍有一定的发病率［1］。水痘发病后病情严重，部分患者会出现弥漫性出血性水痘，具有致死性［2］。水痘的传染性较高，传染率＞90%［3］。当前治疗水痘的方法主要是对症治疗和抗病毒药物，阿昔洛韦、更昔洛韦等药物已证明可加速愈合、缩短病程［4］。本文分析膜抗原荧光抗体试验法在检测水痘-带状疱疹病毒血清抗体中作用，观察更昔洛韦联合匹多莫德治疗水痘的临床疗效，现报道如下。

1 临床资料

1.1 一般资料 选取2011年1月至2014年12月本院水痘患者127例，男76例，女51例；年龄18～43岁，平均年龄（25.8±4.9）岁。所有患者入院时间为症状出现后1～3d，入院时均有典型的水痘皮疹和发热症状，其诊断均参考《实用传染病学》（第三版）中关于水痘的诊断标准，血细胞检查结果显示总白细胞计数偏低或正常，抗水痘-带状疱疹病毒IgG抗体（人抗VZV-IgG）呈阳性。均排除重症水痘、自身免疫性疾病、病毒性肝炎、肝肾功能不良者。随机分为观察组72例和对照组55例，两组年龄、性别比和入院时间等一般资料差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。另随机选取同期体检健康人群387例为健康组，男202例，女185例；年龄1～73岁，平均年龄（23.9±9.1）岁。

1.2 方法 （1）检测方法：采用膜抗原荧光抗体试验法检测人抗VZV-IgG［5］。采用0.01 mol磷酸盐缓冲液（PBS）（pH=7.2）将以上三组的待检血清与阴性对照血清进行2、4、8、16、32、64倍稀释至不同浓度。采用PBS作为空白对照，用人抗VZV-IgG阴性血清作为阴性对照，采用人抗VZV-IgG标准品（5IU，英国国家生物制品检定所）作为阳性对照，并采用对单纯疱疹病毒或人巨细胞病毒免疫的家兔血清作为交叉反应对照。取25μl不同浓度待检血清样品加至96孔U型底聚氯乙烯板（丹麦Nunc公司）中，每孔加入25μl浓度为1×105个/ml经VZV感染后的人胚成纤维细胞，经室温培养1h后取出96孔板，在每孔中加入150μl PBS置振荡器内充分混匀，40℃温度下高速离心15min，弃上清液，再重复上述PBS洗涤操作2次。在每孔中加入25μl用含0.01%伊文斯蓝染料的PBS（含FITC标记的羊抗人IgG），振荡混匀后室温培养1h，40℃温度下高速离心15min，弃上清液，再重复上述PBS洗涤操作2次后得沉淀。在每孔中加入25μl含90%甘油的PBS中悬浮沉淀，吸取10μl悬浮液滴于载玻片，采用荧光显微镜（日本Olympus公司）观察。如细胞边缘无完整黄绿色荧光环，仅有红色背景为阴性；如细胞边缘有完整黄绿色荧光环，且有红色背景为阳性。（2）治疗方法：给予观察组和对照组相同的水痘对症治疗方法，主要包括卧床休息，进食易消化食物，保证食物中足够的水分与营养；发热者予解热药；皮肤瘙痒症状严重者给予抗组胺药物和外用氧化锌炉甘石洗剂；细菌性感染者给予合理的抗感染药物。给予对照组更昔洛韦注射液（上海新亚药业有限公司）0.5g静脉滴注，2次/d。观察组在对照组基础上给予匹多莫德分散片（北京朗依制药有限公司）0.8g口服，2次/d。两组均连续给药10d为1个疗程。

1.3 疗效评价方法 治疗期间观察两组退热时间、皮疹干涸时间和皮疹结痂时间，并在治疗1个疗程后按照以下标准评价疗效［6］。显效：退热时间＜48h，皮疹结痂，且不再有新的皮疹出现，无痛痒感；有效：退热时间48～72h，皮疹结痂，且不再有新的皮疹出现，痛痒感基本消失；无效：退热时间＞72h或发热不退，皮疹不结痂，或出现新的皮疹，痛痒感明显。总有效=显效+有效。

1.4 统计学方法 采用SPSS 20.0统计软件。计量资料用（x±s）表示，用t检验；计数资料比较用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 人抗VZV-IgG测定结果 两组人抗VZV-IgG测定结果均为阳性。健康组中不同年龄人群人抗VZV-IgG测定结果有不同的阳性率，不同年龄人群阳性率差异有统计学意义（χ2=104.815，P＜0.05）；而不同年龄人群性别中阳性率差异无统计学意义（χ2=0.469、0.005、0.146、0.077、0.011、0.000，P＞0.05）。见表 1。

表1 健康组不同年龄人群的人抗VZV-IgG测定结果

2.2 两组退热时间、皮疹干涸时间和皮疹结痂时间比较 治疗期间，观察组退热时间、皮疹干涸时间和皮疹结痂时间均低于对照组（t=3.122、3.387、7.892，P＜0.05）。见表 2。

表2 两组退热时间、皮疹干涸时间和皮疹结痂时间比较［d，（x±s）］

2.3 疗效评价结果 两组总有效率比较，差异有统计学意义（χ2=4.246，P＜0.05）见表3。

表3 两组疗效比较［n（%）］

2.4 药物不良反应 两组治疗期间的心电图、肝肾功能检查均正常。观察组治疗期间患者出现注射部位红肿1例，血小板减少1例，食欲不振、恶心2例，药物不良反应发生率5.56%。对照组则出现腹泻2例，食欲不振、恶心1例，头晕1例，药物不良反应发生率7.27%。两组的药物不良反应发生率差异无统计学意义（χ2=0.156，P＞0.05）。

3 讨论

水痘是由VZV感染造成的传染性疾病，主要临床表现是皮肤出疹，并有多种皮疹形态，皮肤和黏膜出现丘疹、斑疹、疱疹与结痂，但可能并发细菌性感染，出现脓疱疹，其全身临床症状一般比较轻微，但严重者也会出现脑炎或肺炎等并发症［7］。VZV感染后人体会产生终身免疫力，因而再次感染后不会出现水痘，但仍可引起带状疱疹。水痘的自限性决定本疾病的主要发病人群为儿童和青少年，人抗VZV-IgG测定结果表明随着年龄的增长，人抗VZV-IgG阳性率越来越低，且阳性率的年龄差异有统计学意义。但由于我国并未完全普及水痘疫苗的接种工作，因此仍有一定比例的成年水痘病例出现，感染后的潜伏期通常是2～3周，起病后进展迅速，皮疹先发于四肢和头皮，并蔓延向躯干等部位，具有向心性分布特征，躯干部位的皮疹较多，而四肢部位的皮疹相对较少［8］。

VZV的致病原与免疫原性有关的糖蛋白主要表达在VZV的囊膜中以及受其感染的细胞膜中，因此膜抗原荧光抗体试验法中标记产生的抗原-抗体复合物在受感染细胞的细胞膜，在荧光显微镜下可观察到细胞表面有完整黄绿色的荧光环［9］。本文使用伊文斯蓝荧光染料优于其他染料，方便荧光显微镜的观察。将待检血清进行2倍稀释可作为判断人抗VZV-IgG是否为阳性的临界浓度。在荧光显微镜的观察下，细胞的边缘没有完整黄绿色荧光环，仅有红色背景为人抗VZV-IgG阴性；细胞的边缘有完整黄绿色荧光环，且有红色背景为人抗VZV-IgG阳性。此外，VZV对细胞的感染具有普遍性，可分布于细胞的各个结构中，因此即使是阴性的情况，也通常不会出现完全没有荧光的情况，如仅在细胞的胞核、细胞碎片等结构中见到荧光，仍不应判断为人抗VZV-IgG阳性。

更昔洛韦可选择性抑制VZV的DNA聚合酶，从而阻断病毒的DNA合成进程，具有良好的抗疱疹病毒作用［10］。匹多莫德是免疫调节药，可刺激与调节机体的细胞免疫过程，具有增强机体免疫力的作用。匹多莫德可直接激活参与细胞免疫功能的自然杀伤细胞；通过刺激有丝分裂原，造成淋巴细胞的快速增殖，可提高辅助性T细胞/抑制性T细胞比值从而恢复受损的T细胞免疫作用；提高中性粒细胞和巨噬细胞的趋化性，增强吞噬活性；还可以提高γ-干扰素、白介素-2水平而增强机体细胞免疫作用［11］。观察组通过更昔洛韦和匹多莫德联合应用，明显减少患者治疗期间的退热时间、皮疹干涸时间和皮疹结痂时间，治疗总有效率达95.83%，从而缩短住院时间，减少患者痛苦，具有良好的临床应用价值。

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