张泉，周奕奕，樊星，韩鸿玲

(1 天津医科大学总医院,天津300052；2 天津市第四中心医院)

中国高尿酸血症相关疾病诊疗多学科专家共识将血尿酸水平>7 mg/dL定义为高尿酸血症，并指出其与心血管疾病、高血压、代谢综合征等密切相关[1]。既往研究发现，高尿酸水平不仅能导致动脉血管内皮细胞舒张功能受损[2]，还可通过诱导氧化应激反应、激活肾素-血管紧张素系统导致血管内皮功能障碍，引起动脉粥样硬化。但目前高尿酸血症对肾小球内皮细胞影响的报道较少，其作用机制尚不完全清楚。2016年5月～2017年2月，我们观察了体外高浓度尿酸对肾小球内皮细胞的影响，并探讨其可能的作用机制。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 人肾小球内皮细胞(HRGEC)，购自北京北纳创联生物技术研究院。尿酸(U2625-25G，≥99%)，美国Sigma公司；实验前用不含血清的RPMI 1640培养液配制成4、8、16 mg/dL的尿酸溶液。所有引物由上海生工生物工程股份有限公司设计合成。倒置荧光显微镜，美国BD公司；多功能酶标仪，美国Thermo Scientific公司；实时荧光定量PCR仪，瑞士Roche公司；垂直电泳仪、电转移装置，美国Bio-Rad公司。TRIzol，美国Invitrogen公司；CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒，上海BestBio贝博生物公司；活性氧(ROS)检测试剂盒，江苏碧云天生物技术研究所；RNA逆转录试剂盒、RT-PCR试剂盒，大连宝生物工程有限公司；核因子-κB(NF-κB) p65、细胞间黏附分子1(ICAM-1)一抗，英国Abcam公司；内皮型一氧化氮合酶(eNOS)一抗，美国CST公司；单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)一抗，美国BD公司；β-actin二抗，美国Absci公司。

1.2 实验分组处理 HRGEC常规传代培养，取传5～15代、对数生长期、生长状态良好细胞，接种于含10% FBS RPMI 1640培养基的6孔板，每孔4×105个，随机分为阴性对照组、生理浓度尿酸组、中浓度尿酸组、高浓度尿酸组，每组设3个复孔。然……