一种改良的简易灌注分离小鼠肝细胞的方法

2018-02-13

精准医学杂志 2018年6期

(北京大学人民医院药剂科，北京 100044)

肝脏是人体重要的代谢器官之一，可参与多种生理病理过程[1-6]。在肝脏行使的诸多功能中，肝细胞发挥了主要作用，原代培养的肝细胞更接近于机体内环境，因此成为许多体外实验的选择，但肝细胞的分离技术要求高、原代培养的肝细胞增殖能力差，不容易成功。两步灌流法是分离肝细胞的经典方法[7]，该方法分离得到的细胞数量多、存活率及纯度也较高，但该方法所需的灌流装置复杂，操作技术要求高，耗时长，而且不适宜小鼠的肝细胞分离。近年来有文献报道的Ⅳ型胶原酶消化法分离小鼠肝细胞，是一种不经血液灌流的酶直接消化法[8-9]，该方法简单易行，但与传统的灌流法相比，收获的肝细胞数量减少、纯度不够高。因此，建立一种简单易行、高效的分离培养纯化肝细胞的方法十分重要。本研究采用改良的简易两步灌注法分离小鼠肝细胞，并进行原代培养，旨在为肝细胞相关课题的研究奠定基础。现将结果报告如下。