肖宁 唐蓉玉 金彬 信泽祥 王建峰 赵划晟 黄初阳 戴润林 龙永福

膀胱癌在全世界恶性肿瘤中居第11位，其中尿路上皮癌占大部分。局限性尿路上皮癌可分为非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)和肌层浸润性膀胱癌(MIBC)，其中NMIBC占据75%，而且50%的MIBC患者最终发生转移[1-2]。丹参酮ⅡA (tanshinoneⅡA， TanⅡA) 是中药丹参的有效成分，研究发现其具有明显的抗癌作用[3-4]。TanⅡA可以诱导尿路上皮癌T24细胞凋亡、抑制细胞转移，但是具体机制并不明晰[5]。本研究通过建立T24细胞小鼠膀胱癌移植瘤模型，在体内研究TanⅡA对膀胱癌的增殖抑制，以及对极光激酶A (Aurora A)、缺氧诱导因子-1α (HIF-1α) 和B淋巴细胞瘤-2基因 (Bcl-2) 表达的影响，进而探讨TanⅡA的抗癌机制。

材料与方法

一、细胞及试剂

人膀胱癌细胞株T24购自上海门谍塔生物科技发展有限公司。DMEM培养液(美国Gibco公司)；胎牛血清(美国Gibco公司)；Trizol总RNA提取试剂(美国Invitrogen公司)；引物合成及内参(上海生工生物工程公司)。

二、仪器

RT-PCR仪(美国Abi公司)；水平电泳槽(北京君意东方仪器公司)；DG-Ⅲ双稳数显电泳仪(北京鼎国生物技术发展中心)；高速离心机(德国Sigma公司)。

三、膀胱癌T24细胞动物模型的建立

正常培养T24细胞，约3 d传1代，至一定数量后开始各项分组操作。以1×107/ml细胞浓度，注射雄性BALB/-nu裸鼠(4～6 W周龄)，每注射点接种总体积0.2 ml，选择双侧腰肋区皮下。饲养裸鼠至第7天，开始测量瘤体大小(最长径a和最短径b，1次/3 d，连续6次)。以时间为横坐标，肿瘤体积为纵坐标，绘制肿瘤增殖曲线。肿瘤体积按照公式计算，V=a×b2×0.52(mm3)。

四、动物分组及给药方法

接种T24细胞1周后，20只裸鼠模型随机分为对照组和TanⅡA组，每组10只。……