梁朝霞　陆东阁　葛林　张高明　徐庆雷

【摘要】 目的 探讨分析子宫颈感染人乳头瘤病毒（HPV）的基因分布特点。方法 选取120例疑似子宫颈HPV感染患者作为研究对象， 使用实时荧光聚合酶链式反应（PCR）技术对患者宫颈脱落细胞临床样本进行HPV基因检测， 观察HPV感染率及基因分布情况， HPV感染的年龄分布情况， HPV感染率与受教育程度的关系。结果 在120例患者中共检测出17种基因亚型， 其中检测出的阳性标本108例， 最常见的感染亚型：高危型：HPV16（23.15%， 25/108）、HPV52（14.81%， 16/108）、HPV53（12.04%， 13/108）、HPV59（7.41%， 8/108）、HPV18（6.48%， 7/108）；低危型：HPV11（15.74%， 17/108）、HPV81（12.96%， 14/108）。

108例阳性标本中单一HPV基因亚型感染77例（71.30%）， 两种及两种以上的HPV混合型感染31例（28.70%）。40～50岁HPV感染率最高， 占53.70%（58/108）。初中及以下学历患者感染率最高， 占40.74%（44/108）。

结论 子宫颈感染HPV的基因亚型主要为HPV16、HPV52、HPV18、HPV53、HPV59、HPV11、HPV81，

感染年龄大多在40～50岁之间， 随着年龄的增长感染率有上升趋势， 感染型多为单一型。

【关键词】 人乳头瘤病毒；子宫颈；感染；基因分布

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.04.032

宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一， HPV是引发宫颈癌的首要因素。据相关报道， 我国女性子宫颈癌的发病率为15.3%[1]。近年来， 我国宫颈癌的发病率越来越高， 且患者趋向于年轻化。就目前而言， 已鉴定出HPV有100多种亚型， 根据地区的差异发病的几率也不同， 国内研究子宫颈感染HPV的基因分布特点已成为热点， 为积极治疗宫颈癌做出临床依据。本研究以本院2016年7月～2017年5月收治的120例疑似子宫颈HPV感染患者为依据， 分析HPV感染患者的基因分布特点， 现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选择本院2016年7月～2017年5月收治的120例疑似子宫颈HPV感染患者为研究对象， 所有患者均进行HPV基因型检测， 患者年龄20～60岁， 平均年龄（36.6±

7.8）岁， 文化水平：初中及以下45例、高中42例、大学及以上33例， 所有患者至少有1年性生活史、无其他内外科疾病且24 h内无性生活， 非经期采集样本。

1. 2 标本采集与保存 样本采集前均经患者同意， 由固定的医师先用消毒棉球擦拭宫颈口分泌物， 用宫颈刷在宫颈口处顺时针旋转3圈以上获得足够多的上皮细胞， 迅速放入

3 ml宫颈细胞保存液中， 沿着刷柄折痕折断， 拧紧瓶盖， 标记好样本， 放置在4℃的环境中保存， 严格按照标准化操作说明进行[2]， 5 d内检验。

1. 3 检测方法 按照以下步骤进行：①采用江苏硕世生物提取试剂盒提取DNA， 子宫脱落细胞样本保存液500 μl， 12000 r/min离心1 min， 将上清液丢弃， 使用试剂盒提取DNA；②HPV扩增， 使用江苏硕世生物DNA扩增试剂盒进行预处理， 依据试剂盒说明书进行；③使用上海宏石SLAN-96S实时荧光PCR分析仪进行HPV基因分型检测。

1. 4 观察指标 观察HPV感染率及基因分布情况， HPV感染的年龄分布情况， HPV感染率与受教育程度的关系。

2 结果

2. 1 HPV感染率及基因分布情况 在120例患者中共检测出17种基因亚型， 其中检测出的阳性标本108例， 最常见的感染亚型：高危型：HPV16（23.15%， 25/108）、HPV52（14.81%， 16/108）、HPV53（12.04%， 13/108）、HPV59（7.41%， 8/108）、HPV18（6.48%， 7/108）；低危型：HPV11（15.74%， 17/108）、HPV81

（12.96%， 14/108）。108例阳性标本中单一HPV基因亚型感染77例（71.30%）， 其中低危型33例（42.86%）， HPV16、52、18、43在单一HPV基因亚型感染中检出率分别为22.08%（17/77）、18.18%（14/77）、12.99%（10/77）、9.09%（7/77）；两种及两种以上的HPV混合型感染31例（28.70%）， 最多有五重感染；感染型多为单一型。

2. 2 HPV感染的年龄分布 40～50岁HPV感染率最高， 占53.70%（58/108）， 20～30岁组占10.19%（11/108）， 30～40岁组占17.59%（19/108）， 50～60歲组占18.52%（20/108）。

2. 3 HPV感染率与受教育程度的关系 初中及以下学历患者感染率最高， 占40.74%（44/108）， 高中学历占36.11%

（39/108）， 大学及以上学历占23.15%（25/108）。

3 讨论

宫颈癌是全世界女性比较常见的恶性肿瘤之一， 大量流行病学和分子生物学研究结果表明， HPV与宫颈癌及癌前病变密切相关[3-6]。在现阶段中HPV是引发宫颈癌的明确致病因子， HPV高危型病毒几乎存在于所有宫颈癌患者的病例样本中。HPV的传播方式主要以性传播为主， 目前国内各地区有关HPV感染与宫颈病变关系的调查研究已广泛开

展[7]。通过HPV分型检测技术来筛查宫颈癌， 对于宫颈癌的早期发现、早期诊断及早期治疗具有重要的临床意义。endprint

子宫颈感染HPV由于所在的地区、所处的年龄不同感染情况存在很大的差异[8-10]。地理环境对HPV基因型的分类有直接而深刻的影响， 同时， 宫颈癌也受到HPV基因型的直接而深刻的影响。本研究显示120例患者中检测出HPV阳性108例， 单一HPV基因亚型最多。因此开展宫颈癌健康知识的普及是十分有必要的。发病率以40～50岁最高， 占53.70%；其次为50～60岁， 占18.52%；宫颈癌的发病与年龄有一定的关系， 目前已经普遍认为该病在35～59岁高发。本研究的HPV阳性也多集中于此年龄段。这可能和该年龄段的女性性生活状况与生活习惯有关[3]。因此， 加强以上年龄段女性HPV普查工作， 对宫颈癌的早期发现和早期治疗具有重要意义。值得注意的是， 在20～30岁中的HPV阳性发病率10%左右， 这可能与当代社会的发展、性生活过早、过频、多性伴侣及各种激素食品的食用现象的出现有关[2]。这提示宫颈癌的发病已经逐渐年轻化。因此， 积极开展HPV感染基因亚型检测以预防宫颈癌前病变的发生刻不容缓。本研究根据女性受教育程度的不同分类发现， 高学历女性患病率较低， 原因可能是文化程度越高， 其居住环境、生活习惯、机体免疫力越强有关[4]。通过本次研究对于掌握本地区女性HPV感染的现状与HPV型别分布状态， 预防宫颈癌前病变和宫颈癌的发生具有重要的意义。

综上所述， 子宫颈感染HPV的基因亚型主要为HPV16、HPV52、HPV18、HPV53、HPV59、HPV11、HPV81， 感染年龄大多在40～50岁之间， 随着年龄的增长感染率有上升趋势， 感染型多为单一型。

参考文献

[1] 王洪珍， 史红锦. 感染人乳头瘤病毒女性子宫颈病变情况分析. 江苏大学学报（医学版）， 2014（6）：525-528.

[2] 肖传宇， 李艳. 女性子宫颈感染人乳头瘤病毒的基因分布、感染状况及其危险因素分析. 检验医学与临床， 2015（17）：2608-2610.

[3] 張立营， 陈朴， 龙琴， 等. 宜宾地区女性感染人乳头瘤病毒状况分析. 河北医药， 2015（19）：2997-2999.

[4] 金夏， 赵卫东， 朱园园， 等. 700例女性HPV感染分型特点及相关因素分析. 安徽医科大学学报， 2012， 47（10）：1226-1229.

[5] 吴夏枫， 喻晶， 刘晓翌， 等. 1000例妇女宫颈人乳头瘤病毒基因分型检测结果分析. 中国实验诊断学， 2013， 17（5）：865-867.

[6] 唐霄， 杨帆， 何英， 等. 人乳头瘤病毒基因亚型分布及与宫颈病变关系分析. 实用妇产科杂志， 2013， 29（4）：302-305.

[7] 彭瑛， 黄远帅， 邓正华， 等. 人乳头瘤病毒宫颈感染各亚型分布特点. 国际检验医学杂志， 2014（15）：2002-2003.

[8] 满宝华， 汪坚， 黄艳梅， 等. 1372例宫颈感染人乳头瘤病毒基因分型的探讨. 分子诊断与治疗杂志， 2014， 6（2）：110-112.

[9] 黄成琳， 张晶， 常晓晗， 等. 阴道病变中宫颈人乳头瘤病毒基因型分布特征分析. 中国实用妇科与产科杂志， 2016（2）：163-167.

[10] 刘梅. 妇女宫颈人乳头瘤病毒基因分型检测结果分析. 安徽医学， 2014（2）：224-226.

[收稿日期：2017-06-21]endprint