张艳艳 郑晓红 张筱英

缺血性脑卒中是目前导致患者死亡的三大主要病因之一，而幸存者也大多遗留永久性残疾，其不仅严重威胁人类健康，还给社会和家庭造成了巨大的负担。尽早恢复血流并积极采取脑保护治疗是治疗急性脑缺血的主要措施，在时间窗内静脉或动脉溶栓是目前比较认可和有效的方法，而脑保护剂疗效仍有待研究者进一步证实。研究发现脑缺血缺氧情况下，损伤后的神经元释放三磷酸腺苷（ATP）至胞外［1-2］，激活其配体门控性通道P2X受体（ATP受体亚型）［3-4］，进一步激活小胶质细胞，而过度活化的小胶质细胞可释放一氧化氮合酶、促炎因子等物质介导炎症反应进一步损伤神经元，而阻断小胶质细胞的过度活化可减少炎症因子的释放，降低缺血导致的神经损伤。本研究拟探讨P2X受体拮抗剂（TNP-ATP、PPADS）在大鼠脑缺血性损伤后对神经元的保护作用。

1 材料和方法

1.1 实验动物 Sprague-Dawley 成年健康雄性大鼠280～360g，购自浙江省医学科学院实验动物中心。

1.2 主要试剂与仪器 （1）TNP-ATP试剂盒：美国，Molecular Probes公司。（2）PPADS试剂盒：美国，Sigma Aldrich公司。（3）脑立体定向仪：深圳，瑞沃德公司。（4）电子显微镜：日本，Olympus公司。

1.3 方法 （1）大鼠MCAO模型的建立：采用线栓法堵塞大脑中动脉制作脑梗死模型（MCAO）［5］，缺血90min后抽出栓线即可造成再灌注模型。模型成功的标志为大鼠手术麻醉清醒后出现左侧肢体瘫痪，站立不稳，提尾时向一侧转圈为模型成功的判断标准。假性手术组仅作皮肤切开和血管剥离，不做栓线处理。（2）实验分组与给药方式：实验动物随机分为4组：假性手术组、脑梗死组（对照组）、脑梗死+ P2X受体拮抗剂TNP-ATP组（简称TNP-ATP组）、脑梗死+ P2X受体拮抗剂PPADS组（简称PPADS组）。……